Leica Novocastra Liquid Mode D'emploi page 46

Timpii sau temperaturile de incubație care diferă de valorile specificate pot genera rezultate eronate. Orice astfel de modificări trebuie
validate de către utilizator.
Controlul calității
Diferențele în ceea ce privește procesarea țesutului și procedurile tehnice în laboratorul utilizatorului pot cauza o variabilitate
semnificativă a rezultatelor, necesitând efectuarea cu regularitate de controale interne, în plus față de următoarele proceduri.
Probele de control trebuie să fie probe proaspete de autopsie/biopsie/chirurgicale, fixate în formalină, procesate și încorporate în ceară
de parafină cât mai curând posibil și în aceeași manieră ca și probele pacientului.
Țesutul de control pozitiv
Folosit pentru a indica țesuturile pregătite corect și tehnicile de colorare adecvate.
O probă de țesut de control pozitiv trebuie să fie inclusă pentru fiecare set de condiții de testare în fiecare etapă de colorare.
Un țesut cu colorare pozitivă slabă este mai adecvat decât un țesut cu colorare pozitivă puternică în vederea unui control optim al
calității și pentru a detecta nivelurile minore de degradare a reactivului.
2
Țesutul de control pozitiv recomandat este colonul.
Dacă țesutul de control pozitiv nu demonstrează colorația pozitivă, rezultatele obținute cu acele probe de testare trebuie considerate
nevalide.
Țesutul de control negativ
Trebuie examinat după țesutul de control pozitiv pentru a verifica specificitatea informațiilor de etichetare ale antigenului țintă în funcție
de anticorpul primar.
Țesutul de control negativ recomandat este cerebelul.
Ca alternativă, varietatea de tipuri diferite de celule prezente în majoritatea secțiunilor tisulare oferă frecvent locuri de control negativ, dar
acest lucru trebuie verificat de către utilizator.
Colorația nespecifică, dacă este prezentă, are, de obicei, un aspect difuz. Colorația sporadică a țesutului conjunctiv poate fi observată,
de asemenea, în secțiuni de țesuturi fixate în mod excesiv în formalină. Folosiți celule intacte pentru interpretarea rezultatelor de
colorare. Celulele necrotice sau degenerate se colorează deseori într-un mod nespecific. Se pot observa rezultate fals pozitive ca
3
urmare a legării non-imunologice a proteinelor sau produșilor de reacție ai substratului. Acestea pot fi cauzate, de asemenea, de
enzimele endogene precum pseudoperoxidaza (eritrocite), peroxidaza endogenă (citocromul C) sau biotina endogenă (de exemplu,
ficat, sân, creier, rinichi), în funcție de tipul de imunocolorație folosit. Pentru a diferenția activitatea enzimelor endogene sau legarea
nespecifică a enzimelor de imunoreactivitatea specifică, pot fi colorate țesuturi suplimentare de la pacient numai cu substrat-cromogen
sau, respectiv, complexe enzimatice (avidină-biotină, streptavidină, polimer etichetat) și substrat-cromogen. În cazul în care colorația
specifică are loc în țesutul de control negativ, rezultatele obținute pe probele pacientului trebuie să fie considerate nevalide.
Reactivul de control negativ
Folosiți un reactiv de control negativ non-specific în locul anticorpului primar cu o secțiune din fiecare specimen al pacientului pentru a
evalua colorația nespecifică și a permite o mai bună interpretare a colorării specifice la situl antigenului.
Țesutul pacientului
Examinați specimenele pacientului colorate cu NCL-L-CEA-609 ultimele. Intensitatea colorației pozitive trebuie evaluată în contextul
oricărei colorații de fond nespecifice a reactivului de control negativ. La fel ca în cazul oricărui test imunohistochimic, un rezultat negativ
înseamnă că antigenul nu a fost detectat, și nu că antigenul a fost absent în celulele/țesuturile analizate. Dacă este necesar, folosiți un
panel pentru anticorpi pentru identificarea reacțiilor fals negative.
Rezultate așteptate
Țesuturi normale
Clona COL-1 a detectat antigenul carcinoembrionic în celulele epiteliale ale colonului, rectului, esofagului și laringelui și în mucoasa
scuamoasă a colului uterin. (Numărul total al cazurilor normale = 150).
Țesuturi anormale
Clona COL-1 a colorat 58/65 tumori de colon (incluzând 20/23 adenocarcinoame metastatice, 18/22 adenocarcinoame, 6/6 adenoame,
5/5 polipi, 4/4 adenocarcinoame mucinoase, 3/3 adenocarcinoame mucinoase metastatice și 2/2 carcinoame metastatice cu celule inel
sigiliu), 33/77 tumori pulmonare (incluzând 14/28 adenocarcinoame, 12/28 carcinoame cu celule scuamoase, 3/8 carcinoame cu celule
mici, 1/6 carcinoide atipice, 1/3 carcinoame cu celule mari, 1/2 carcinoame metastatice cu celule scuamoase și 1/2 adenocarcinoame
metastatice), 10/49 tumori ovariene (incluzând 3/12 adenocarcinoame endometrioide, 3/3 adenocarcinoame mucinoase, 2/6
adenocarcinoame papilare seroase, 1/3 cistadenocarcinoame mucinoase, 1/3 cistadenoame mucinoase, 0/5 adenocarcinoame seroase,
0/4 tumori cu celule tecale, 0/3 tumori cu celule granuloase, 0/3 carcinoame nediferențiate, 0/2 carcinoame de sinus endodermic, 0/1
disgerminom, 0/1 teratom imatur, 0/1 leiomiosarcom, 0/1 cistadenom mucinos de limită și 0/1 adenocarcinom), 5/11 tumori metastatice
(incluzând 3/4 carcinoame gastrice metastatice, 2/4 carcinoame mamare metastatice, 0/1 carcinom nasofaringien metastatic, 0/1
adenocarcinom tiroidian metastatic și 0/1 carcinom esofagian metastatic cu celule scuamoase), 5/5 colite cronice, 4/4 boli ale lui Crohn,
3/3 adenocarcinoame gastrice, 2/2 tumori ale intestinului subțire (incluzând 1/1 adenom și 1/1 adenocarcinom), 2/2 carcinoame de col
uterin cu celule scuamoase, 1/3 carcinoame esofagiene cu celule scuamoase, 1/2 adenocarcinoame endometriale, 1/1 carcinom al
pielii cu celule scuamoase și 1/1 carcinom al limbii cu celule scuamoase. Nu s-a observat vreo colorare în tumori mamare (0/5), tumori
tiroidiene (0/5), tumori cerebrale (0/4), carcinoame hepatocelulare (0/4), limfoame (0/3), tumori prostatice (0/2), tumori ale capului
și gâtului (0/2), tumori ale glandei suprarenale (0/2), tumori ale vezicii urinare (0/2), tumori osoase (0/2), tumori ale glandei salivare
(0/2), seminoame (0/2), tumori renale (0/2), o tumoare pancreatică (0/1), o hiperplazie prostatică (0/1), un melanom (0/1), un caz de
tuberculoză a colonului (0/1) și un feocromocitom (0/1). (Numărul total al cazurilor anormale = 267).
NCL-L-CEA-609 este recomandat pentru detectarea antigenului carcinoembrionic în țesuturile normale și neoplazice, ca
adjuvant al histopatologiei convenționale, utilizând coloranți histochimici non-imunologici.
CEA-609-L-CE
Page 45