Leica Novocastra Liquid Mode D'emploi page 25

Ελαχιστοποιήστε τη μικροβιακή μόλυνση των αντιδραστηρίων, διότι ενδέχεται να συμβεί αύξηση μη ειδικής χρώσης.
Χρόνοι ή θερμοκρασίες επώασης διαφορετικές από εκείνες που καθορίζονται ενδέχεται να δώσουν εσφαλμένα αποτελέσματα. Τυχόν
τέτοιες μεταβολές πρέπει να επικυρώνονται από το χρήστη.
Ποιοτικός Έλεγχος
Τυχόν διαφορές στην επεξεργασία των ιστών και τις τεχνικές διαδικασίες στο εργαστήριο του χρήστη ενδέχεται να προκαλέσουν
σημαντική μεταβλητότητα στα αποτελέσματα, καθιστώντας αναγκαία την τακτική εκτέλεση εσωτερικών ελέγχων επιπλέον των ακόλουθων
διαδικασιών.
Οι μάρτυρες θα πρέπει να είναι φρέσκα δείγματα νεκροψίας/βιοψίας/χειρουργικά δείγματα, τα οποία είναι μονιμοποιημένα σε φορμόλη,
επεξεργασμένα και εγκλεισμένα σε κηρό παραφίνης, το συντομότερο δυνατό με τον ίδιο τρόπο με το(α) δείγμα(τα) του ασθενούς.
Θετικός Μάρτυρας Ιστού
Χρησιμοποιείται για να υποδεικνύει σωστά παρασκευασμένους ιστούς και σωστές τεχνικές χρώσης.
Θα πρέπει να περιλαμβάνεται ένας θετικός μάρτυρας ιστού για κάθε σύνολο συνθηκών εξέτασης σε κάθε εκτέλεση χρώσης.
Ένας ιστός με ασθενή θετική χρώση είναι πιο κατάλληλος από έναν ιστό με ισχυρή θετική χρώση για βέλτιστο έλεγχο ποιότητας και για
την ανίχνευση πολύ μικρών επιπέδων τυχόν αποδόμησης των αντιδραστηρίων.
2
Συνιστώμενος ιστός θετικού μάρτυρα είναι το κόλον.
Εάν ο θετικός μάρτυρας ιστού δεν παρουσιάζει θετική χρώση, τα αποτελέσματα με τα δείγματα της εξέτασης θα πρέπει να θεωρούνται
άκυρα.
Αρνητικός Μάρτυρας Ιστού
Θα πρέπει να εξετάζεται μετά τον θετικό μάρτυρα ιστού για την επαλήθευση της ειδικότητας της επισήμανσης του αντιγόνου-στόχου από
το πρωτοταγές αντίσωμα.
Συνιστώμενος ιστός αρνητικού μάρτυρα είναι η παρεγκεφαλίδα.
Εναλλακτικά, η ποικιλία διαφόρων κυτταρικών τύπων που υπάρχουν στις περισσότερες τομές ιστών παρέχει συχνά θέσεις αρνητικού
μάρτυρα, αλλά αυτό πρέπει να επαληθεύεται από το χρήστη.
Μη ειδική χρώση, εάν υπάρχει, έχει συνήθως διάχυτη εμφάνιση. Ενδέχεται επίσης να παρατηρηθεί σποραδική χρώση του συνδετικού
ιστού σε τομές από ιστούς που έχουν μονιμοποιηθεί με υπερβολική ποσότητα φορμόλης. Χρησιμοποιείτε άθικτα κύτταρα για την
ερμηνεία των αποτελεσμάτων της χρώσης. Νεκρωτικά ή εκφυλισμένα κύτταρα παρουσιάζουν συχνά μη ειδική χρώση. Ενδέχεται να
3
παρατηρηθούν ψευδώς θετικά αποτελέσματα λόγω μη ανοσολογικής δέσμευσης των πρωτεϊνών ή των προϊόντων αντίδρασης του
υποστρώματος. Ενδέχεται επίσης να προκληθούν από ενδογενή ένζυμα, όπως η ψευδοϋπεροξειδάση (ερυθροκύτταρα), η ενδογενής
υπεροξειδάση (κυτόχρωμα C) ή η ενδογενής βιοτίνη (π.χ. ήπαρ, μαστός, εγκέφαλος, νεφρός) ανάλογα με τον τύπο ανοσοχρώσης που
χρησιμοποιείται. Για τη διαφοροποίηση της ενδογενούς ενζυμικής δραστικότητας ή της μη ειδικής δέσμευσης των ενζύμων από ειδική
ανοσοαντιδραστικότητα, είναι δυνατό να χρωματιστούν αποκλειστικά επιπλέον ιστοί ασθενών με χρωμογόνο υποστρώματος ή ενζυμικά
σύμπλοκα (αβιδίνη-βιοτίνη, στρεπταβιδίνη, σημασμένο πολυμερές) και υπόστρωμα-χρωμογόνο, αντίστοιχα. Εάν παρουσιαστεί ειδική
χρώση στον αρνητικό μάρτυρα ιστού, τα αποτελέσματα με τα δείγματα ασθενούς θα πρέπει να θεωρούνται άκυρα.
Αρνητικός Μάρτυρας Αντιδραστηρίου
Χρησιμοποιείτε έναν μη ειδικό αρνητικό μάρτυρα αντιδραστηρίου αντί του πρωτοταγούς αντισώματος με μια τομή κάθε δείγματος
ασθενούς για την αξιολόγηση μη ειδικής χρώσης και για να επιτρέπεται καλύτερη ερμηνεία της ειδικής χρώσης στη θέση του αντιγόνου.
Ιστός Ασθενούς
Εξετάστε τα δείγματα ασθενών που έχουν υποβληθεί σε χρώση με NCL-L-CEA-609 τελευταία. Η ένταση της θετικής χρώσης θα πρέπει
να εκτιμάται στα πλαίσια τυχόν μη ειδικής χρώσης υποβάθρου του αρνητικού μάρτυρα αντιδραστηρίου. Όπως συμβαίνει με οποιαδήποτε
ανοσοϊστοχημική εξέταση, ένα αρνητικό αποτέλεσμα σημαίνει ότι το αντιγόνο δεν ανιχνεύτηκε, όχι ότι το αντιγόνο δεν υπήρχε στα
κύτταρα/στον ιστό που εξετάστηκε. Εάν είναι απαραίτητο, χρησιμοποιήστε μια σειρά αντισωμάτων για την αναγνώριση ψευδώς
αρνητικών αντιδράσεων.
Αναμενόμενα Αποτελέσματα
Φυσιολογικοί ιστοί
Ο κλώνος COL-1 ανίχνευσε το καρκινοεμβρυϊκό αντιγόνο σε επιθηλιακά κύτταρα του κόλου, του ορθού, του οισοφάγου και του λάρυγγα,
καθώς και στο πλακώδες βλεννογόνο του τραχήλου της μήτρας. (Συνολικός αριθμός φυσιολογικών περιστατικών = 150).
Ανώμαλη ιστού
Ο κλώνος COL-1 προκάλεσε χρώση σε 58/65 όγκους στο κόλον (στους οποίους συμπεριλαμβάνονταν 20/23 μεταστατικά
αδενοκαρκινώματα, 18/22 αδενοκαρκινώματα, 6/6 αδενώματα, 5/5 πολύποδες, 4/4 βλεννώδη αδενοκαρκινώματα, 3/3 μεταστατικά
βλεννώδη αδενοκαρκινώματα και 2/2 μεταστατικά καρκινώματα εν είδη σφραγιστήρος δακτυλίου), 33/77 όγκους των πνευμόνων
(στους οποίους συμπεριλαμβάνονταν 14/28 αδενοκαρκινώματα, 12/28 ακανθοκυτταρικά καρκινώματα, 3/8 μικροκυτταρικά
καρκινώματα, 1/6 άτυπα καρκινοειδή, 1/3 μεγαλοκυτταρικά καρκινώματα, 1/2 μεταστατικά ακανθοκυτταρικά καρκινώματα και
1/2 μεταστατικά καρκινώματα), 10/49 όγκους των ωοθηκών (στους οποίους περιλαμβάνονταν 3/12 αδενοκαρκινώματα του ενδομητρίου,
3/3 βλεννώδη αδενοκαρκινώματα, 2/6 ορώδη θηλώδη αδενοκαρκινώματα, 1/3 βλεννώδη κυσταδενοκαρκινώματα, 1/3 βλεννώδη
κυσταδενώματα, 0/5 ορώδη αδενοκαρκινώματα, 0/4 όγκοι των κυττάρων της θήκης, 0/3 όγκοι κοκκιώδους στιβάδας της ωοθήκης,
0/3 μη διαφοροποιημένα καρκινώματα, 0/2 καρκινώματα ενδοδερμικού κόλπου, 0/1 δυσγερμίνωμα, 0/1 ανώριμο τεράτωμα,
0/1 λειομυοσάρκωμα, 0/1 βλεννώδες κυσταδένωμα οριακής κακοήθειας και 0/1 αδενοκαρκίνωμα), 5/11 μεταστατικούς όγκους (στους
οποίους συμπεριλαμβάνονταν 3/4 μεταστατικά γαστρικά καρκινώματα, 2/4 μεταστατικά καρκινώματα του μαστού, 0/1 μεταστατικό
καρκίνωμα του ρινοφάρυγγα, 0/1 μεταστατικό αδενοκακρίνωμα του θυρεοειδούς και 0/1 μεταστατικό ακανθοκυτταρικό καρκίνωμα του
οισοφάγου), 5/5 χρόνιες κολίτιδες, 4/4 νόσους Crohn, 3/3 αδενοκαρκινώματα του στομάχου, 2/2 όγκους του λεπτού εντέρου (στους
οποίους περιλαμβάνονταν 1/1 αδένωμα και 1/1 αδενοκαρκίνωμα), 2/2 ακανθοκυτταρικά καρκινώματα του τραχήλου της μήτρας,
1/3 ακανθοκυτταρικά καρκινώματα του οισοφάγου, 1/2 αδενοκακρκινώματα του ενδομητρίου, 1/1 ακανθοκυτταρικό καρκίνωμα
του δέρματος και 1/1 ακανθοκυτταρικό καρκίνωμα της γλώσσας. Δεν ανιχνεύτηκε χρώση σε όγκους του μαστού (0/5), όγκους του
θυρεοειδούς (0/5), όγκους του εγκεφάλου (0/4), ηπατοκυτταρικά καρκινώματα (0/4), λεμφώματα (0/3), όγκους του προστάτη (0/2),
όγκους της κεφαλής και του τραχήλου (0/2), όγκους των επινεφριδίων (0/2), όγκους της ουροδόχου κύστης (0/2), όγκους των οστών
(0/2), όγκους των σιελογόνων αδένων (0/2), σεμινώματα (0/2), όγκους των νεφρών (0/2), έναν όγκο του παγκρέατος (0/1), μία
προστατική υπερπλασία (0/1), ένα μελάνωμα (0/1), μία περίπτωση φυματίωσης του κόλου (0/1) και ένα φαιοχρωμοκύττωμα (0/1).
(Συνολικός αριθμός μη φυσιολογικών περιστατικών = 267).
Το NCL-L-CEA-609 συνιστάται για την ανίχνευση του καρκινοεμβρυϊκού αντιγόνου σε φυσιολογικό και νεοπλασματικό ιστό, ως
συμπλήρωμα της συμβατικής ιστοπαθολογίας χρησιμοποιώντας μη ανοσολογικές ιστοχημικές χρώσεις.
CEA-609-L-CE
Page 24