Leica Novocastra Liquid Mode D'emploi page 43

Minőség-ellenőrzés
A felhasználó laboratóriumában alkalmazott szövetfeldolgozási és technikai eljárások eltérései jelentős különbséget okozhatnak az
eredményekben, ami az alábbi eljárásokon túl belső kontrollok rendszeres futtatását teszi szükségessé.
Kontrollként friss boncolási/biopsziás/sebészeti mintákat kell használni, amelyeket a lehető leghamarabb a betegmintákkal megegyező
módon kell formalinban fixálni, feldolgozni és paraffinviaszba ágyazni.
Pozitív szövetkontroll
A megfelelő szövet-előkészítés és festési technikák ellenőrzésére használatos.
Minden tesztelési körülményegyüttes esetében és minden megfestési sorozatban kell alkalmazni egy pozitív szövetkontrollt.
A gyengén pozitív festődésű szövet alkalmasabb az erősebben pozitív festődésű szövetnél az optimális minőség-ellenőrzéshez,
valamint a kismértékű reagensbomlás észleléséhez.
2
A javasolt pozitív kontrollszövet a vastagbél.
Ha a pozitív szövetkontroll nem mutat pozitív festődést, a vizsgált minták eredményeit érvénytelennek kell tekinteni.
Negatív szövetkontroll
A pozitív szövetkontroll után azért kell megvizsgálni, hogy a vizsgált antigén elsődleges antitest segítségével történő jelölésének
specificitását ellenőrizni lehessen.
A javasolt negatív kontrollszövet a kisagy.
Ezenkívül a legtöbb szövetmetszetben jelen lévő különböző sejttípusok gyakran használhatók negatív kontrollként, de ezeket a
felhasználónak kell ellenőriznie.
Ha van nem specifikus festődés, az rendszerint diffúz megjelenésű. A formalinban túlfixált szövetekből származó metszeteknél a
kötőszövet szórványos festődése is megfigyelhető. A festési eredmények értelmezésére ép sejteket használjon. A nekrotizált vagy
degenerálódott sejtek gyakran nem specifikusan festődnek meg. A fehérjék vagy a szubsztrát reakciótermékeinek nem immunológiai
3
kötődése miatt álpozitív eredmények jelentkezhetnek. Okozhatják ezt olyan endogén enzimek is, mint a pszeudoperoxidáz (eritrociták),
endogén peroxidáz (citokróm C), illetve endogén biotin (pl. máj, mell, agy, vese), az alkalmazott immunmegfestés típusától függően. Az
endogén enzim aktivitásának vagy az enzimek nem specifikus kötődésének a specifikus immunreakciótól való megkülönböztetésére
további betegszövetek festhetők kizárólag szubsztrát–kromogén oldattal vagy enzimkomplexekkel (avidin-biotin, sztreptavidin, jelölt
polimer) és szubsztrát–kromogénnel. Ha a negatív szövetkontroll specifikus festődést mutat, a betegminták eredményeit érvénytelennek
kell tekinteni.
Negatív reagenskontroll
A nem specifikus festődés kiértékeléséhez és az antigén helyén létrejövő specifikus festődés jobb értelmezéséhez minden betegminta
esetén egy metszeten alkalmazzon az elsődleges antitest helyett nem specifikus negatív reagenskontrollt.
Betegszövet
Az NCL-L-CEA-609 reagenssel festett betegmintákat vizsgálja meg utolsóként. A pozitív festődés intenzitását a negatív reagenskontroll
esetleges nem specifikus háttérfestődésének viszonylatában értékelje. Mint minden immunhisztokémiai vizsgálatnál, a negatív
eredmény azt jelenti, hogy az antigén nem volt kimutatható, nem pedig azt, hogy az antigén nem volt jelen a vizsgált sejtekben/
szövetben. Szükség esetén az álnegatív reakciók azonosítására használjon antitestpanelt.
Várható eredmények
Normál szövetek
A COL-1 klón kimutatta a karcinoembrionikus antigént a vastagbél, végbél, nyelőcső és gége hámsejtjeiben, valamint a méhnyak
laphámsejtes nyálkahártyájában. (Normál esetek összesített száma = 150).
Kóros szövetek
A COL-1 klón megfestett 58/65 vastagbél-daganatot (beleértve 20/23 áttétes adenokarcinómát, 18/22 adenokarcinómát, 6/6 adenómát,
5/5 polipot, 4/4 mucinózus adenokarcinómát, 3/3 áttétes mucinózus adenokarcinómát és 2/2 áttétes pecsétgyűrűsejtes karcinómát),
33/77 tüdődaganatot (beleértve 14/28 adenokarcinómát, 12/28 laphámsejtes karcinómát, 3/8 kissejtes karcinómát, 1/6 atípusos
karcinoidot, 1/3 nagysejtes karcinómát, 1/2 áttétes laphámsejtes karcinómát és 1/2 áttétes adenokarcinómát), 10/49 petefészek-
daganatot (beleértve 3/12 endometrioid adenokarcinómát, 3/3 mucinózus adenokarcinómát, 2/6 szerózus papilláris adenokarcinómát,
1/3 mucinózus cisztadenokarcinómát, 1/3 mucinózus cisztadenómát, 0/5 szerózus adenokarcinómát, 0/4 thecasejtes daganatot,
0/3 granulosasejtes daganatot, 0/3 nem differenciált karcinómát, 0/2 endodermális szinusz karcinómát, 0/1 diszgerminómát,
0/1 éretlen teratómát, 0/1 leiomioszarkómát, 0/1 borderline mucinózus cisztadenómát és 0/1 adenokarcinómát), 5/11 áttétes daganatot
(beleértve 3/4 áttétes gyomorkarcinómát, 2/4 áttétes emlőkarcinómát, 0/1 áttétes nazofaringeális karcinómát, 0/1 áttétes pajzsmirigy-
adenokarcinómát és 0/1 áttétes laphámsejtes nyelőcső-karcinómát), 5/5 krónikus vastagbélgyulladást, 4/4 Crohn-betegséget,
3/3 gyomor-adenokarcinómát, 2/2 vékonybél-daganatot (beleértve 1/1 adenómát és 1/1 adenokarcinómát), 2/2 laphámsejtes
méhnyak-karcinómát, 1/3 laphámsejtes nyelőcső-karcinómát, 1/2 endometrium adenokarcinómát, 1/1 laphámsejtes bőrkarcinómát és
1/1 laphámsejtes nyelvkarcinómát. Nem volt festődés megfigyelhető emlődaganatok (0/5), pajzsmirigy-daganatok (0/5), agydaganatok
(0/4), hepatocelluláris karcinómák (0/4), limfómák (0/3), prosztatadaganatok (0/2), fej- és nyaki daganatok (0/2), mellékvese-daganatok
(0/2), húgyhólyag-daganatok (0/2), csontdaganatok (0/2), nyálmirigy-daganatok (0/2), szeminómák (0/2), vesedaganatok (0/2),
hasnyálmirigy-daganat (0/1), prosztata-hiperplázia (0/1), melanóma (0/1), vastagbél-tuberkulózis (0/1) és feokromocitóma (0/1) esetén.
(Kóros esetek összesített száma = 267).
Az NCL-L-CEA-609 a karcinoembrionikus antigén detektálására ajánlott normál és daganatos szövetekben, a
nem immunológiai hisztokémiai festést használó hagyományos kórszövettani eljárások kiegészítéseként.
Általános korlátozások
Az immunhisztokémia több lépésből álló diagnosztikai folyamat, amely a következőket foglalja magában: speciális képzés alapján a
megfelelő reagensek kiválasztása; a szövetek kiválasztása, fixálása és feldolgozása; az IHC tárgylemez előkészítése; és a festési
eredmények értelmezése.
CEA-609-L-CE
Page 42