Leica Novocastra Liquid Mode D'emploi page 49

В отношении утилизации любых потенциально опасных компонентов следуйте требованиям федеральных, региональных и
местных нормативных документов.
С образцами (до и после фиксации) и всеми материалами, которые находятся под их воздействием, следует обращаться как со
способными к передаче инфекции и утилизировать, соблюдая соответствующие меры предосторожности. Никогда не набирайте
1
реактивы в пипетку ртом и не допускайте контакта реактивов и образцов с кожей и слизистыми оболочками. В случае контакта
реактивов или образцов с чувствительными зонами промойте их большим количеством воды. Обратитесь за медицинской
помощью.
Сводите к минимуму микробное загрязнение реактивов во избежание усиления неспецифического окрашивания.
Инкубация при сроках и температурах, отличных от указанных в инструкции, может дать ошибочные результаты. Любые
подобные изменения должны быть валидированы пользователем.
Контроль качества
Различия в методах обработки тканей и технических процедурах, выполняемых в лаборатории пользователя, могут привести к
существенной вариабельности результатов, в связи с чем требуется регулярное выполнение внутрилабораторных контролей в
дополнение к указанным ниже процедурам.
В качестве контролей следует использовать свежие образцы, полученные при аутопсии, биопсии или хирургических процедурах,
фиксированные в формалине, обработанные и как можно скорее залитые в парафин так же, как были обработаны полученные
у пациентов образцы.
Положительный контроль ткани
Применяется для проверки правильности подготовки тканей и методов окрашивания.
В каждый набор условий теста при каждом цикле окрашивания следует включать один срез ткани для положительного контроля.
Для оптимального контроля качества и обнаружения незначительных уровней деградации реактива более подходит ткань со
слабым положительным окрашиванием, чем ткань с сильным положительным окрашиванием.
2
В качестве положительного контроля рекомендуется ткань толстого кишечника.
При отсутствии положительного окрашивания ткани, использующейся в качестве положительного контроля, результаты,
полученные с исследуемыми образцами, считаются недействительными.
Отрицательный контроль ткани
Этот тест необходимо выполнять после положительного контроля ткани для проверки специфичности мечения целевого
антигена первичным антителом.
В качестве отрицательного контроля рекомендуется ткань мозжечка.
Кроме того, разнообразные типы клеток для отрицательного контроля можно часто найти в большинстве срезов тканей, однако
такие препараты должны быть проверены пользователем.
Неспецифическое окрашивание, если оно присутствует, обычно выглядит диффузным. В срезах тканей, избыточно
фиксированных формалином, можно также иногда увидеть окрашивание соединительной ткани. Для интерпретации
результатов окрашивания используйте интактные клетки. Некротизированные или разрушенные клетки часто окрашиваются
неспецифически. Неиммунное связывание белков или продуктов реакции с субстратом может привести к ложноположительным
3
результатам. Такие же результаты могут быть связаны с эндогенными ферментами, например псевдопероксидазой (в
эритроцитах), эндогенной пероксидазой (цитохром C) или эндогенным биотином (например, в печени, молочной железе,
головном мозге или почке) в зависимости от типа использованного иммунного окрашивания. Чтобы отличить активность
эндогенных ферментов или неспецифическое связывание ферментов от специфической иммунореактивности, можно
выполнить окрашивание дополнительных тканей пациента исключительно хромогенным субстратом или ферментными
комплексами (авидин-биотин, стрептавидин, меченый полимер) и хромогенным субстратом соответственно. При наличии
специфического окрашивания в отрицательном контроле ткани результаты исследования полученных у пациентов образцов
считаются недействительными.
Отрицательный контроль реактива
Для оценки неспецифического окрашивания и лучшей интерпретации специфического окрашивания в области связывания
антигена, исследуя срезы каждого образца, взятого у пациента, вместо первичных антител используйте реактив, служащий в
качестве неспецифического отрицательного контроля.
Ткань, полученная у пациента
Исследуйте образцы взятой у пациента ткани, которые окрашены с помощью NCL-L-CEA-609, в последнюю очередь.
Интенсивность положительного окрашивания следует оценивать с учетом любого неспецифического фонового окрашивания
отрицательного контроля реактива. Как и при любом иммуногистохимическом исследовании, отрицательный результат означает
необнаружение антигена, но не его отсутствие в исследованных клетках или ткани. При необходимости следует использовать
панель антител для выявления ложноотрицательных реакций.
Ожидаемые результаты
Нормальные ткани
Клон COL-1 обнаружил карциноэмбриональный антиген в эпителиальных клетках толстого кишечника, прямой кишки, пищевода
и гортани, а также в плоском эпителии шейки матки. (Общее число образцов неизмененных тканей, которые были исследованы
= 150.)
Патологически пораженные ткани
Клон COL-1 окрасил 58/65 случаев опухолей кишечника (включая 20/23 случаев метастатической аденокарциномы,
18/22 случаев аденокарциномы, 6/6 случаев аденомы, 5/5 случаев полипов, 4/4 случаев муцинозной аденокарциномы,
3/3 случаев метастатической муцинозной аденокарциномы и 2/2 случаев ), метастатической карциномы перстневидных клеток),
33/77 случаев опухоли легких (включая 14/28 случаев аденокарциномы, 12/28 случаев плоскоклеточной карциномы, 3/8 случаев
мелкоклеточной карциномы, 1/6 случаев атипических карциноидных опухолей, 1/3 случаев крупноклеточной карциномы,
1/2 случаев метастатической плоскоклеточной карциномы и 1/2 случаев метастатической аденокарциномы), 10/49 случаев
опухоли яичников (включая 3/12 случаев эндометриоидной аденокарциномы, 3/3 случаев муцинозной аденокарциномы,
CEA-609-L-CE
Page 48