Publicité
Les langues disponibles
Les langues disponibles
С образцами (до и после фиксации) и всеми материалами, которые находятся под их воздействием, следует обращаться как со
способными к передаче инфекции и утилизировать, соблюдая соответствующие меры предосторожности.
Никогда не набирайте
1
реактивы в пипетку ртом и не допускайте контакта реактивов и образцов с кожей и слизистыми оболочками. В случае контакта
реактивов или образцов с чувствительными зонами промойте их большим количеством воды. Обратитесь за медицинской
помощью.
Сводите к минимуму микробное загрязнение реактивов во избежание усиления неспецифического окрашивания.
Инкубация при сроках и температурах, отличных от указанных в инструкции, может дать ошибочные результаты. Любые
подобные изменения должны быть валидированы пользователем.
Контроль качества
Различия в методах обработки тканей и технических процедурах, выполняемых в лаборатории пользователя, могут привести к
существенной вариабельности результатов, в связи с чем требуется регулярное выполнение внутрилабораторных контролей в
дополнение к указанным ниже процедурам.
В качестве контролей следует использовать свежие образцы, полученные при аутопсии, биопсии или хирургических процедурах,
фиксированные в формалине, обработанные и как можно скорее залитые в парафин так же, как были обработаны полученные
у пациентов образцы.
Положительный контроль ткани
Применяется для проверки правильности подготовки тканей и методов окрашивания.
В каждый набор условий теста при каждом цикле окрашивания следует включать один срез ткани для положительного контроля.
Для оптимального контроля качества и обнаружения незначительных уровней деградации реактива более подходит ткань со
слабым положительным окрашиванием, чем ткань с сильным положительным окрашиванием.
2
В качестве положительного контроля рекомендуется использовать ткани миндалин.
При отсутствии положительного окрашивания положительного контроля ткани результаты, полученные с исследуемыми
образцами, считаются недействительными.
Отрицательный контроль ткани
Этот тест необходимо выполнять после положительного контроля ткани для проверки специфичности мечения целевого
антигена первичным антителом.
В качестве отрицательного контроля рекомендуется ткань мозжечка.
Кроме того, разнообразные типы клеток для отрицательного контроля можно часто найти в большинстве срезов тканей, однако
такие препараты должны быть проверены пользователем.
Неспецифическое окрашивание, если оно присутствует, обычно выглядит диффузным. В срезах тканей, избыточно
фиксированных формалином, можно также иногда увидеть окрашивание соединительной ткани. Для интерпретации
результатов окрашивания используйте интактные клетки. Некротизированные или разрушенные клетки часто окрашиваются
неспецифически.
Неиммунное связывание белков или продуктов реакции с субстратом может привести к ложноположительным
3
результатам. Такие же результаты могут быть связаны с эндогенными ферментами, например псевдопероксидазой (в
эритроцитах), эндогенной пероксидазой (цитохром C) или эндогенным биотином (например, в печени, молочной железе,
головном мозге или почке) в зависимости от типа использованного иммунного окрашивания. Чтобы отличить активность
эндогенных ферментов или неспецифическое связывание ферментов от специфической иммунореактивности, можно
выполнить окрашивание дополнительных тканей пациента исключительно хромогенным субстратом или ферментными
комплексами (авидин-биотин, стрептавидин, меченый полимер) и хромогенным субстратом соответственно. При наличии
специфического окрашивания в отрицательном контроле ткани результаты исследования полученных у пациентов образцов
считаются недействительными.
Отрицательный контроль реактива
Для оценки неспецифического окрашивания и лучшей интерпретации специфического окрашивания в области связывания
антигена, исследуя срезы каждого образца, взятого у пациента, вместо первичных антител используйте реактив, служащий в
качестве неспецифического отрицательного контроля.
Ткань, полученная у пациента
Исследуйте полученные у пациентов образцы, окрашенные NCL-L-bcl-2, в последнюю очередь. Интенсивность положительного
окрашивания следует оценивать с учетом любого неспецифического фонового окрашивания отрицательного контроля реактива.
Как и при любом иммуногистохимическом исследовании, отрицательный результат означает необнаружение антигена, но не
его отсутствие в исследованных клетках или ткани. При необходимости следует использовать панель антител для выявления
ложноотрицательных реакций.
Ожидаемые результаты
Нормальные ткани
Клон bcl-2/100/D5 окрашивал цитоплазму и мембраны лимфоцитов в мантийной зоне и на участках скопления Т-клеток
селезенки, лимфатических узлов, миндалин и вилочковой железы. Окрашивание также наблюдалось в почечных канальцах,
базальных кератиноцитах, безальных эпителилальных клетках шейки матки и фаллопиевой трубы, стромальных фибробластах
молочной железы и яичника, гладкомышечных клетках миометрии и синцитиальных трофобластах плаценты. (Общее число
исследованных нормальных тканей = 55).
Патологически измененные ткани
Клон bcl-2/100/D5 окрасил 88/113 случаев диффузной крупноклеточной В-лимфоцитарной лимфомы, 8/26 случаев лимфомы
Ходжкина, 13/15 случаев фолликулярной лимфомы, 11/12 случаев хронических лимфоцитарных лимфом, 7/7 случаев
лимфомы мантийной зоны, 3/6 случаев анапластической Т-лимфоцитарной лимфомы, 4/4 случаев ангиоиммунобластной
Т-лимфоцитарной лимфомы, 3/3 случаев Т-лимфоцитарной лимфомы, 3/3 случаев лимфомы из Т/NK-клеток, 1/1 случая острой
В-лимфоцитарной лимфобластной лимфомы, 1/1 случая острой лимфобластной лимфомы из примитивных В/Т-лимфоцитов,
1/1 случая периферийной Т-лимфоцитарной лимфомы и 1/1 случая лимфомы из клеток маргинальной зоны, 2/4 случаев
опухоли легких (включая 1/1 случая немелкоклеточной карциномы, 1/1 случая аденокарциномы, 0/1 случая плоскоклеточной
BCL-2-L-CE
Page 48
Publicité
