Publicité
Les langues disponibles
Les langues disponibles
Las muestras, antes y después de ser fijadas, así como todos los materiales expuestos a ellas, deben manipularse como
susceptibles de transmitir una infección, y se deben desechar tomando las precauciones adecuadas.
No pipetee nunca los
1
reactivos con la boca, y evite el contacto de la piel y de las membranas mucosas con los reactivos y las muestras. Si los reactivos o las
muestras entran en contacto con zonas delicadas, lave éstas con abundante agua. Acuda inmediatamente al médico.
Reduzca al mínimo la contaminación microbiana de los reactivos; de lo contrario, podría producirse un aumento de la tinción no
específica.
Cualquier tiempo o temperatura de incubación que no sean los aquí especificados pueden conducir a resultados erróneos. Cualquier
cambio de tal naturaleza debe ser validado por el usuario.
Control De Calidad
Las diferencias en el procesamiento de los tejidos y en los procedimientos técnicos del laboratorio del usuario pueden producir
una variabilidad significativa en los resultados; por ello, es necesario que éste lleve a cabo regularmente los controles de su propio
laboratorio, además de los siguientes procedimientos.
Los controles deben ser muestras frescas de autopsia, biopsia o quirúrgicas fijadas en formol, procesadas e incluidas en parafina, lo
antes posible, de manera idéntica a la utilizada para la muestra o muestras del paciente o pacientes.
Control Tisular Positivo
Se utiliza para indicar la preparación correcta de los tejidos y las técnicas de tinción adecuadas.
Debe incluirse un control tisular positivo por cada conjunto de condiciones de ensayo en cada tinción o serie de tinciones realizada.
Un tejido con una tinción positiva débil es más adecuado que un tejido con una tinción positiva intensa para lograr un control de calidad
óptimo y para detectar niveles bajos de degradación del reactivo.
2
El tejido de control positivo recomendado es el de amígdala.
Si el tejido de control positivo no muestra tinción positiva, los resultados de las muestras analizadas deben considerarse no válidos.
Control Tisular Negativo
Debe examinarse después del control de tejido positivo, a fin de verificar la especificidad del marcado del antígeno diana por el
anticuerpo primario.
El tejido de control negativo recomendado es el de cerebelo.
O bien, la variedad de diferentes tipos de células presentes en la mayoría de los cortes de tejido ofrece con frecuencia lugares de
control negativo, pero esto debe ser verificado por el usuario.
Si aparece una tinción no específica, ésta tiene generalmente aspecto difuso. En cortes de tejido fijados excesivamente con formol
puede observarse también una tinción esporádica del tejido conectivo. Utilice células intactas para la interpretación de los resultados de
la tinción. A menudo, las células necróticas o degeneradas quedan teñidas de forma no específica.
También pueden observarse falsos
3
positivos causados por la unión no inmunológica a proteínas o a productos de reacción del sustrato. Estos falsos positivos pueden
estar causados también por enzimas endógenas tales como la pseudoperoxidasa (eritrocitos), la peroxidasa endógena (citocromo C),
o la biotina endógena (por ejemplo, de hígado, mama, cerebro, riñón), en función del tipo de inmunotinción utilizada. Para diferenciar
la actividad de las enzimas endógenas o los enlaces no específicos de las enzimas de la inmunorreactividad específica, pueden
teñirse otros tejidos del paciente exclusivamente con cromógeno sustrato o con complejos enzimáticos (avidina-biotina, estreptavidina,
polímeros marcados) y cromógeno sustrato respectivamente. Si se produce una tinción específica del control tisular negativo, los
resultados de las muestras de los pacientes deben considerarse no válidos.
Control De Reactivo Negativo
Utilice un control de reactivo negativo no específico en lugar del anticuerpo primario con un corte de cada muestra del paciente a fin de
evaluar la tinción no específica y obtener una mejor interpretación de la tinción específica en el lugar en que se encuentra el antígeno.
Tejido Del Paciente
Examine las muestras del paciente o pacientes teñidas con NCL-L-bcl-2 al final. La intensidad de la tinción positiva debe
valorarse en el contexto de cualquier tinción de fondo no específica del control de reactivo negativo. Como con cualquier prueba
inmunohistocitoquímica, un resultado negativo significa que no se ha detectado antígeno, y no que el antígeno esté ausente en las
células o tejido probados. Si es necesario, use un panel de anticuerpos para identificar falsas reacciones negativas.
Resultados esperados
Tejidos normales
El clon bcl-2/100/D5 tiñó el citoplasma y la membrana de linfocitos de las zonas del manto y zonas de células T del bazo, ganglios
linfáticos, amígdala y timo. También se observó tinción en los túbulos renales, queratinocitos basales, células epiteliales basales
del cuello uterino y de las trompas de Falopio, en fibroblastos estromales mamarios y del ovario, en las células del músculo liso del
miometrio y en sincitiotrofoblastos de la placenta. (Número total de casos normales evaluados = 55).
Anormal del tejido
El clon bcl-2/100/D5 tiñó 88/113 linfomas difusos de células B grandes, 8/26 enfermedad de Hodgkin, 13/15 linfomas foliculares,
11/12 linfomas linfocíticos crónicos, 7/7 linfomas de células del manto, 3/6 linfomas anaplásicos de células T grandes, 4/4 linfomas
angioinmunoblásticos de células T, 3/3 linfomas de células T, 3/3 linfomas de células T/NK, 1/1 linfoma linfoblástico agudo de células B,
1/1 linfoma linfoblástico agudo primitivo de células B/T, 1/1 linfoma periférico de células T y 1/1 linfoma de zona marginal, 2/4 tumores
pulmonares (incluyendo 1/1 carcinoma pulmonar amicrocítico, 1/1 adenocarcinoma, 0/1 carcinoma epidermoide y 0/1 carcinoma de
células grandes), 2/4 tumores ováricos (incluyendo 1/1 cistadenocarcinoma seroso, 1/1 carcinoma de células claras, 0/1 tumor de
células germinales malignas y 0/1 cistadenocarcinoma mucinoso), 1/4 tumores hepáticos (incluyendo 1/1 carcinoma metastásico, 0/2
carcinomas hepatocelulares y 0/1 colangiocarcinoma), 3/3 carcinomas papilares tiroideos, 2/2 carcinomas infiltrantes de los conductos
mamarios, 2/2 tumores mestastásicos de origen desconocido, 1/2 carcinomas de células renales, 1/2 carcinomas de células escamosas
del cuello uterino y 1/1 carcinoide atípico del timo. No se observó ninguna tinción en tumores cerebrales (0/2), tumores esofágicos (0/2),
tumores de estómago (0/2), tumores de lengua (0/2), tumores testiculares (0/2), tumores de colon (0/2), tumores rectales (0/2), tumores
cutáneos (0/2), tumores del tejido blando (0/2) y un tumor de la laringe (0/1). (Número total de casos de tumor evaluados = 236).
NCL-L-bcl-2 se recomienda para la evaluación de la expresión de la oncoproteína bcl-2 en tejidos normales y neoplásicos.
BCL-2-L-CE
Page 15
Publicité
