Publicité
Les langues disponibles
Les langues disponibles
Χρόνοι ή θερμοκρασίες επώασης διαφορετικές από εκείνες που καθορίζονται ενδέχεται να δώσουν εσφαλμένα αποτελέσματα. Τυχόν
τέτοιες μεταβολές πρέπει να επικυρώνονται από το χρήστη.
Ποιοτικός Έλεγχος
Τυχόν διαφορές στην επεξεργασία των ιστών και τις τεχνικές διαδικασίες στο εργαστήριο του χρήστη ενδέχεται να προκαλέσουν
σημαντική μεταβλητότητα στα αποτελέσματα, καθιστώντας αναγκαία την τακτική εκτέλεση εσωτερικών ελέγχων επιπλέον των ακόλουθων
διαδικασιών.
Οι μάρτυρες θα πρέπει να είναι φρέσκα δείγματα νεκροψίας/βιοψίας/χειρουργικά δείγματα, τα οποία είναι μονιμοποιημένα σε φορμόλη,
επεξεργασμένα και εγκλεισμένα σε κηρό παραφίνης, το συντομότερο δυνατό με τον ίδιο τρόπο με το(α) δείγμα(τα) του ασθενούς.
Θετικός Μάρτυρας Ιστού
Χρησιμοποιείται για να υποδεικνύει σωστά παρασκευασμένους ιστούς και σωστές τεχνικές χρώσης.
Θα πρέπει να περιλαμβάνεται ένας θετικός μάρτυρας ιστού για κάθε σύνολο συνθηκών εξέτασης σε κάθε εκτέλεση χρώσης.
Ένας ιστός με ασθενή θετική χρώση είναι πιο κατάλληλος από έναν ιστό με ισχυρή θετική χρώση για βέλτιστο έλεγχο ποιότητας και για
την ανίχνευση πολύ μικρών επιπέδων τυχόν αποδόμησης των αντιδραστηρίων.
2
Συνιστώμενος ιστός θετικού μάρτυρα είναι η αμυγδαλή.
Εάν ο θετικός μάρτυρας ιστού δεν παρουσιάζει θετική χρώση, τα αποτελέσματα με τα δείγματα της εξέτασης θα πρέπει να θεωρούνται
άκυρα.
Αρνητικός Μάρτυρας Ιστού
Θα πρέπει να εξετάζεται μετά τον θετικό μάρτυρα ιστού για την επαλήθευση της ειδικότητας της επισήμανσης του αντιγόνου-στόχου από
το πρωτοταγές αντίσωμα.
Συνιστώμενος ιστός αρνητικού μάρτυρα είναι η παρεγκεφαλίδα.
Εναλλακτικά, η ποικιλία διαφόρων κυτταρικών τύπων που υπάρχουν στις περισσότερες τομές ιστών παρέχει συχνά θέσεις αρνητικού
μάρτυρα, αλλά αυτό πρέπει να επαληθεύεται από το χρήστη.
Μη ειδική χρώση, εάν υπάρχει, έχει συνήθως διάχυτη εμφάνιση. Ενδέχεται επίσης να παρατηρηθεί σποραδική χρώση του συνδετικού
ιστού σε τομές από ιστούς που έχουν μονιμοποιηθεί με υπερβολική ποσότητα φορμόλης. Χρησιμοποιείτε άθικτα κύτταρα για την
ερμηνεία των αποτελεσμάτων της χρώσης. Νεκρωτικά ή εκφυλισμένα κύτταρα παρουσιάζουν συχνά μη ειδική χρώση.
Ενδέχεται να
3
παρατηρηθούν ψευδώς θετικά αποτελέσματα λόγω μη ανοσολογικής δέσμευσης των πρωτεϊνών ή των προϊόντων αντίδρασης του
υποστρώματος. Ενδέχεται επίσης να προκληθούν από ενδογενή ένζυμα, όπως η ψευδοϋπεροξειδάση (ερυθροκύτταρα), η ενδογενής
υπεροξειδάση (κυτόχρωμα C) ή η ενδογενής βιοτίνη (π.χ. ήπαρ, μαστός, εγκέφαλος, νεφρός) ανάλογα με τον τύπο ανοσοχρώσης που
χρησιμοποιείται. Για τη διαφοροποίηση της ενδογενούς ενζυμικής δραστικότητας ή της μη ειδικής δέσμευσης των ενζύμων από ειδική
ανοσοαντιδραστικότητα, είναι δυνατό να χρωματιστούν αποκλειστικά επιπλέον ιστοί ασθενών με χρωμογόνο υποστρώματος ή ενζυμικά
σύμπλοκα (αβιδίνη-βιοτίνη, στρεπταβιδίνη, σημασμένο πολυμερές) και υπόστρωμα-χρωμογόνο, αντίστοιχα. Εάν παρουσιαστεί ειδική
χρώση στον αρνητικό μάρτυρα ιστού, τα αποτελέσματα με τα δείγματα ασθενούς θα πρέπει να θεωρούνται άκυρα.
Αρνητικός Μάρτυρας Αντιδραστηρίου
Χρησιμοποιείτε έναν μη ειδικό αρνητικό μάρτυρα αντιδραστηρίου αντί του πρωτοταγούς αντισώματος με μια τομή κάθε δείγματος
ασθενούς για την αξιολόγηση μη ειδικής χρώσης και για να επιτρέπεται καλύτερη ερμηνεία της ειδικής χρώσης στη θέση του αντιγόνου.
Ιστός Ασθενούς
Εξετάστε τελευταία τα δείγματα ασθενούς που έχουν χρωματιστεί με το NCL-L-bcl-2. Η ένταση της θετικής χρώσης θα πρέπει να
εκτιμάται στα πλαίσια τυχόν μη ειδικής χρώσης υποβάθρου του αρνητικού μάρτυρα αντιδραστηρίου. Όπως συμβαίνει με οποιαδήποτε
ανοσοϊστοχημική εξέταση, ένα αρνητικό αποτέλεσμα σημαίνει ότι το αντιγόνο δεν ανιχνεύτηκε, όχι ότι το αντιγόνο δεν υπήρχε στα
κύτταρα/στον ιστό που εξετάστηκε. Εάν είναι απαραίτητο, χρησιμοποιήστε μια σειρά αντισωμάτων για την αναγνώριση ψευδώς
αρνητικών αντιδράσεων.
Αναμενόμενα Αποτελέσματα
Φυσιολογικοί ιστοί
Με τον κλώνο bcl-2/100/D5 χρωματίστηκε το κυτταρόπλασμα και η μεμβράνη των λεμφοκυττάρων σε ζώνες μανδύα και περιοχές Τ
κυττάρων της σπλήνας, του λεμφαδένα, της αμυγδαλής και του θύμου αδένα. Παρατηρήθηκε επίσης χρώση σε νεφρικά σωληνάρια,
βασικά κερατινοκύτταρα, βασικά επιθηλιακά κύτταρα του τραχήλου και της σάλπιγγας, στρωματικούς ινοβλάστες του μαστού και της
ωοθήκης, λεία μυικά κύτταρα του μυομητρίου και συγκυτιοτροφοβλάστες του πλακούντα. (Συνολικός αριθμός φυσιολογικών περιστατικών
που αξιολογήθηκαν = 55).
Ανώμαλη ιστού
Με τον κλώνο bcl-2/100/D5 χρωματίστηκαν 88/113 διάχυτα μεγαλοκυτταρικά λεμφώματα Β κυττάρων, 8/26 νόσος του Hodgkin, 13/15
θυλακιώδη λεμφώματα, 11/12 χρόνια λεμφοκυτταρικά λεμφώματα, 7/7 λεμφώματα από το κύτταρο του μανδύα, 3/6 αναπλαστικά
μεγαλοκυτταρικά λεμφώματα Τ κυττάρων, 4/4 αγγειοανοσοβλαστικά λεμφώματα Τ κυττάρων, 3/3 λεμφώματα Τ κυττάρων, 3/3
λεμφώματα T/NK, 1/1 οξύ λεμφοβλαστικό λέμφωμα Β κυττάρων, 1/1 πρωτοπαθές οξύ λεμφοβλαστικό λέμφωμα B/T κυττάρων,
1/1 περιφερικό λέμφωμα Τ κυττάρων και 1/1 λέμφωμα περιθωριακής ζώνης, 2/4 όγκοι του πνεύμονα (μεταξύ των οποίων 1/1 μη
μικροκυτταρικό καρκίνωμα, 1/1 αδενοκαρκίνωμα, 0/1 ακανθοκυτταρικό καρκίνωμα και 0/1 μεγαλοκυτταρικό καρκίνωμα), 2/4 όγκοι των
ωοθηκών (μεταξύ των οποίων 1/1 ορώδες κυσταδενοκαρκίνωμα, 1/1 διαυγοκυτταρικό καρκίνωμα, 0/1 κακοήθης όγκος γεννητικών
κυττάρων και 0/1 βλεννώδες κυσταδενοκαρκίνωμα), 1/4 όγκοι του ήπατος (μεταξύ των οποίων 1/1 μεταστατικό καρκίνωμα, 0/2
ηπατοκυτταρικά καρκινώματα και 0/1 χολαγγειοκαρκίνωμα), 3/3 θηλώδη καρκινώματα του θυρεοειδούς, 2/2 διηθητικά πορογενή
καρκινώματα του μαστού, 2/2 μεταστατικοί όγκοι αγνώστου προέλευσης, 1/2 νεφροκυτταρικά καρκινώματα, 1/2 ακανθοκυτταρικά
καρκινώματα του τραχήλου και 1/1 άτυπος καρκινοειδής όγκος του θύμου αδένα. Δεν παρατηρήθηκε χρώση σε όγκους του εγκεφάλου
(0/2), όγκους του οισοφάγου (0/2), όγκους του στομάχου (0/2), όγκους της γλώσσας (0/2), όγκους των όρχεων (0/2), όγκους του κόλου
(0/2), όγκους του ορθού (0/2), όγκους του δέρματος (0/2), όγκους μαλακών μορίων (0/2) και έναν όγκο του λάρυγγα (0/1). (Συνολικός
αριθμός περιστατικών με νεοπλασματικούς ιστούς που αξιολογήθηκαν = 236).
Το NCL-L-bcl-2 συνιστάται για χρήση στην ανίχνευση της έκφρασης της ογκοπρωτεϊνης bcl-2 σε φυσιολογικούς και
νεοπλασματικούς ιστούς.
Γενικοί Περιορισμοί
Η ανοσοϊστοχημεία είναι μια διαγνωστική διεργασία πολλαπλών βημάτων, η οποία αποτελείται από ειδικευμένη εκπαίδευση στην
επιλογή των κατάλληλων αντιδραστηρίων, επιλογή ιστού, μονιμοποίηση και επεξεργασία, προετοιμασία της πλάκας IHC και ερμηνεία
των αποτελεσμάτων της χρώσης.
BCL-2-L-CE
Page 24
Publicité
