Dépannage - Leica BIOSYSTEMS HER2 FISH System Mode D'emploi

Dépannage
Problème Cause probable
Signal Fixation ou traitement
fluorescent/ inappropriés d'échantillons
coloration ayant valeur de test
absent(e) ou
Le Leica HER2 FISH System
faible
- 30 Test est utilisé alors que
la date de péremption est
dépassée.
Sélection du protocole
incorrect
Distribution de réactifs en vrac
inappropriée
Déparaffinisation inadéquate
des lames
Prétraitement inapproprié
Dénaturation inadéquate
Hybridation inadéquate
Lavage post-hybridation
excessif
Processus interrompu avant
la fin
Équipement de microscopie à
fluorescence inapproprié
•
•
•
•
Surexposition à la lumière UV
(photoblanchiment)
Page 23 de 26
Jeu de filtres inapproprié
Lampe incorrecte
Lampe périmée
Type d'huile incorrect
Leica Biosystems Mode d'emploi du Leica HER2 FISH System - 30 Test TA9217 EU-FR-CE-Rev_F 17/07/2015
Correction
Vérifier qu'un fixateur à base de formol est
utilisé et que les programmes de traitement
conviennent à l'échantillon qui passe le test.
Vérifier que la date de péremption
spécifiée pour le Leica HER2 FISH System -
30 Test n'est pas dépassée.
Vérifier que la valeur par défaut du *FISH
Protocol A est appropriée dans le champ
du protocole de coloration de la boîte de
dialogue Ajouter lame.
Vérifier que tous les réactifs BOND ont
été attribués aux conteneurs de vrac
appropriés et qu'ils ont été correctement
positionnés sur l'instrument.
Vérifier que le mode *Dewax est sélectionné
dans le champ Préparation de la boîte de
dialogue Ajouter lame.
Vérifier que les protocoles de prétraitement
par défaut (HIER et digestion enzymatique)
sont sélectionnés.
Adapter le protocole de prétraitement (HIER
ou digestion enzymatique) si nécessaire.
Vérifier que la dénaturation par défaut
appropriée *D10 est sélectionnée.
Vérifier que l'hybridation par défaut
appropriée *H12 est sélectionnée.
Prolonger le temps d'hybridation si
nécessaire.
Diminuer le temps d'incubation du lavage
post-hybridation
À l'aide du logiciel BOND, confirmer la
présence d'une erreur rapportable pendant
le processus de coloration et la résoudre en
suivant les instructions du logiciel BOND.
S'assurer que l'équipement de microscopie
à fluorescence utilisé est dans son
intégralité approprié pour le test réalisé,
confirmer :
• Jeu de filtres approprié
• Lampe appropriée
• Puissance de la lampe correcte
• Huile appropriée utilisée pour la
microscopie à immersion dans l'huile
Stocker les lames dans l'obscurité, avant
et après l'évaluation, afin de préserver
les signaux fluorescents. Pour préserver
le signal lors d'un stockage à long terme,
stocker les lames à –20 ºC.