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Instructions d'utilisation
Tous les réactifs fournis sont préparés pour être utilisés avec ce test et les numéros de lot
attribués sont spécifiques à chaque Leica HER2 FISH System - 30 Test. Pour que le test soit
valable, il ne faut rien remplacer.
Stockage et stabilité
Stocker entre 2 et 8 °C. Ne pas congeler. Replacer à une température comprise entre 2 et
8 °C immédiatement après utilisation. Le non-respect de ces conditions entraîne l'invalidité du
test. Vérifier que la date de péremption du Leica HER2 FISH System - 30 Test utilisé n'est pas
dépassée. Les signes indiquant une contamination et/ou une instabilité du Leica HER2 FISH
System - 30 Test sont la turbidité des solutions (à l'exception de la solution de la sonde) et le
développement d'odeur. L'utilisateur doit vérifier les conditions de stockage autres que celles
spécifiées ci-dessus.
Préparation des échantillons
Il faut utiliser des méthodes de traitement standard des tissus pour tous les échantillons (20).
Il est recommandé de préparer les tissus dans des fixateurs à base de formol, de les traiter de
façon routinière et de les enrober à la paraffine. Par exemple, les échantillons doivent avoir une
épaisseur de 3 à 4 mm et être fixés pendant 18 à 24 heures dans du formol neutre tamponné
à 10%. Les tissus doivent ensuite être déshydratés dans de l'alcool, puis éclaircis au xylène, et
enfin imprégnés de paraffine liquide et maintenus à une température ne dépassant pas 60 °C.
Les échantillons tissulaires doivent être coupés à une épaisseur de 4 à 6 µm.
Les coupes tissulaires montées sur les lames chargées (BOND Plus Slides S21.2113) peuvent être
gardées jusqu'à 12 mois entre 2 et 8 °C avant la coloration. Après la coupe, il est recommandé de
laisser les lames incuber à 60 °C pendant une heure. Les coupes colorées doivent être stockées à
-20 °C pour préserver le signal fluorescent et empêcher une décoloration. Attendre que les lames
stockées soient à température ambiante avant de les observer.
Avertissements et précautions
Uniquement pour les utilisateurs professionnels.
Le produit renferme un ou plusieurs produits dangereux qui peuvent être préjudiciables au fœtus.
Les personnes âgées de moins de 18 ans ne sont pas autorisées à travailler avec ce produit.
Les utilisateurs doivent avoir reçu des instructions précises concernant la procédure correcte,
les caractéristiques dangereuses du produit et les prescriptions de sécurité nécessaires.
Les échantillons, avant et après la fixation, ainsi que tous les matériaux exposés à ces
échantillons, doivent être traités comme s'ils étaient susceptibles de transmettre une infection
et éliminés avec les précautions qui s'imposent.
Ne jamais pipetter les réactifs à la bouche et veiller à éviter tout contact des réactifs et des
échantillons avec la peau et les membranes muqueuses. Si les réactifs ou les échantillons
entrent en contact avec des zones sensibles, rincer abondamment à l'eau. Demander conseil
à un médecin. Il convient de se renseigner sur les réglementations locales ou nationales en
vigueur pour l'élimination de tout composant potentiellement toxique.
Minimiser la contamination microbienne des réactifs afin d'éviter une augmentation de
coloration non spécifique.
Procédure
A. Réactifs requis mais non fournis
•
BOND Dewax Solution (AR9222)
•
BOND Epitope Retrieval Solution 1 (AR9961)
•
BOND Wash Solution x10 Concentrate (AR9590)
•
Solvants standard utilisés lors des tests basés sur l'hybridation fluorescente in situ
(p. ex. éthanol, absolu et au degré déterminé)
Leica Biosystems Mode d'emploi du Leica HER2 FISH System - 30 Test TA9217 EU-FR-CE-Rev_F 17/07/2015
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