Agilent Technologies Agilent BioHPLC Guide D'utilisation page 53

Cuidado de la columna
Las columnas con un tamaño de partícula de 1.8 µm cuentan con una frita
de entrada de 0.5 µm. Las partículas bloquearán las fritas de entrada de la
columna, por lo que se deben extraer antes de analizar la muestra. En caso
de que esto no sea posible, se debe usar un filtro en línea o una precolumna
para proteger la columna analítica e incrementar su vida útil. La columna
de mapa de péptidos AdvanceBio incluye una frita de entrada de 2 µm. Las
muestras que contengan materia bioparticulada mayor de 2 µm obstruirán la
frita de entrada. Es recomendable el uso de precolumnas con estas muestras.
Asimismo, se recomienda que se filtren las muestras antes de inyectarlas
sobre cualquier columna y que todos los eluyentes estén recién preparados y
se filtren antes de usarlos.
Consulte agilent.com/chem/guards
de las precolumnas.
Limpieza de la columna y prolongación de su vida útil
En el caso de las columnas que permitan retroflujo (partículas > 1.8 µm),
efectúe la limpieza en la dirección inversa. Empiece con un disolvente más
potente (menos polar).
1. Desconecte la columna del detector y vierta los disolventes de lavado
dentro de un vaso de precipitados.
2. Empiece con la fase móvil sin sales de la solución tampón (agua o
compuestos orgánicos). Haga pasar entre 10 y 20 volúmenes de
columna.
3. A continuación, use componentes orgánicos al 100 % (metanol o
acetonitrilo).
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