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流动相的选择和操作温度
键合固定相是非极性的 , 最好与极性流动相如甲醇 / 水或乙腈 / 水的
混合物一起使用 。 有机成分含量的增加会缩短样品的保留时间 。
采用最高温度长时间使用色谱柱会缩短其使用寿命 。
PLRP-S 色谱柱使用 100% 水相洗脱液会显著缩短其使用寿命 , 并导
致峰宽度和对称性变差 。
推荐的初始梯度
生物分子的分离通常采用不同梯度条件 – 增加有机成分的含量以
实现从柱上洗脱 。 通常采用三氟乙酸 (TFA) 或甲酸 (FA) 等酸性洗脱
液分离肽 、 多肽和蛋白质 , 将这类酸性溶液作为控制 pH 值的改性
剂和 / 或离子对添加剂 , 可以获得理想的保留和选择性 。 有机物如
乙腈 、 甲醇和乙醇可用作洗脱剂 , 其中乙腈是最常用的洗脱剂 。
有关肽分离的详细信息可以参见" chapter 11, pages 497-508, Introduction to
Modern Liquid Chromotography, Second Edition. L.R. Snyder and J. J. Kirkland,
(John Wiley & Sons, 1979) "。