Agilent Technologies Agilent BioHPLC Guide D'utilisation page 45

Colonnes
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Pulizia della colonna/estensione della durata della
colonna
(continua)
4. Verificare la pressione per vedere se è ritornata a condizioni normali;
in caso contrario:
5. Eliminare la colonna oppure considerare condizioni più estreme, per
es. 75% acetonitrile:25% isopropanolo.
6. Aumentare le concentrazioni: 100% isopropanolo, 100% cloruro
di metilene oppure 100% esano (se si usa il cloruro di metilene o
l'esano, sarà necessario lavare la colonna con isopropanolo prima
di utilizzarla e prima di tornare alla fase mobile contenente acqua,
poiché non è miscibile con campioni acquosi).
Con le colonne PLRP-S, possono essere utilizzati cicli di pulizia aggressivi
con NaOH 1 M oppure HCl 1 M all'80% con solventi organici al 20%.
Nel caso di colonne con particelle di 1.8 µm, non procedere al backflush
della colonna; si può tentare la procedura di purificazione come
precedentemente illustrato in dettaglio, ma mantenendo la direzione del
flusso.
Raccomandazioni di conservazione
In generale, le colonne possono essere conservate in modo
sicuro per brevi periodi, nella maggior parte delle fasi mobili. La
conservazione a lungo termine di colonne a fase legata, a base di
silice, deve avvenire in un solvente organico puro. Se la colonna
è già stata utilizzata con una fase mobile tamponata, eliminare
dapprima il tampone, spurgando la colonna con 20 o 30 volumi di
una miscela 50:50 di metanolo o acetonitrile e acqua, seguita da
20 a 30 volumi di solvente puro. Prima dello stoccaggio, i raccordi
terminali devono essere chiusi ermeticamente con tappi terminali
per evitare che l'impaccamento si asciughi e di secchi.
ITALIANO
(continua)

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