Table des Matières
Publicité
peut contenir jusqu'à 84 puits contenant des concentrations variées d'agents antimicrobiens et
1 puits de contrôle de croissance. Les galeries sont disponibles en mode Emerge, ID seule,
AST seul ou en combinaison ID/AST. Les puits inutilisés sont réservés à un usage ultérieur.
Les galeries BD Phoenix™ sont inoculées avec une suspension de microorganisme ajustée à
un standard McFarland spécifique. Les suspensions d'organisme doivent être préparées
uniquement avec le néphélomètre BD BBL™ CrystalSpec™ , le néphélomètre
BD PhoenixSpec™ ou l'instrument BD Phoenix™ AP.
Une fois inoculées, les galeries sont placées dans l'instrument et incubées en continu à 35 °C.
L'instrument teste les galeries toutes les 20 minutes : à l'heure pile, 20 minutes après l'heure
et 40 minutes après l'heure, pendant 16 heures maximum, si nécessaire. Les
galeries BD Phoenix™ sont en lecture seule sur l'instrument BD Phoenix™ M50. Les
galeries BD Phoenix™ ne peuvent pas être lues manuellement.
2.3.1.1
Identification des organismes
Le côté ID de la galerie BD Phoenix™ utilise une série de tests biochimiques conventionnels,
chromogènes et fluorogènes pour déterminer l'identité de l'organisme. Les substrats basés
sur la croissance et les substrats enzymatiques servent à mesurer différents types de
réactivité dans la plage des taxons. Les tests se basent sur l'utilisation et la dégradation
microbiennes de substrats particuliers, détectés par divers systèmes indicateurs. La
production d'acide est indiquée par un changement de couleur de l'indicateur rouge (du rouge
au jaune) lorsqu'un isolat peut utiliser un substrat glucidique. Les substrats chromogènes
produisent une couleur jaune lors de l'hydrolyse enzymatique du composé p-nitrophényl ou du
composé p-nitroanilide. L'hydrolyse enzymatique de substrats fluorogènes entraîne la
libération d'un dérivé fluorescent coumarin. Les organismes qui utilisent une source de
carbone particulière réduisent l'indicateur à base de résazurine. Par ailleurs, d'autres tests
existent pour détecter l'aptitude d'un organisme à l'hydrolyse, la dégradation, la réduction ou
l'utilisation d'un substrat.
Une liste complète de taxons qui constituent la base de données BD Phoenix™ est
fournie dans la section 10.3 Taxons pour la détermination ID/AST. Les réactions
employées par divers substrats et une brève explication des principes utilisés dans les
réactions BD Phoenix™ d'ID Gram négatives, Gram positives, Streptococcus et levures
sont décrites à la section 10.2 Liste des réactifs et principes appliqués dans le
2.3.1.2
Antibiogramme
La méthode AST utilisée par le système BD Phoenix™ M50 est un test par microdilution basé
sur du bouillon. Le système utilise un indicateur d'oxydoréduction pour détecter la croissance
des organismes en présence d'un agent antimicrobien.
variations de l'indicateur, ainsi que la turbidité bactérienne permettent de déterminer la
croissance bactérienne. Chaque configuration d'une galerie AST contient plusieurs agents
antimicrobiens à des concentrations tr ès variées de dilutions doubles. l'ID organisme sert à
interpréter les valeurs CMI (concentration minimale inhibitrice) de chacun des agents
antimicrobiens.
REMARQUE
système BD Phoenix™.
15
Les mesures continues des
2 - Introduction
17
Publicité
Table des Matières
