Manuel d'utilisation du système automatisé de microbiologie BD Phoenix™ M50
5.
Dans les milieux recommandés et en appliquant une technique aseptique, effectuer un
prélèvement dans les colonies de même morphologie à l'aide d'un écouvillon stérile en
coton (sans polyester) ou d'un bâtonnet d'application en bois.
6.
Mettre les colonies en suspension dans le bouillon ID BD Phoenix™ (4,5 ml).
7.
Remettre le capuchon sur le tube et agiter au vortex pendant 5 secondes.
8.
Attendre environ 10 secondes que les bulles d'air remontent à la surface. Tapoter
légèrement sur le tube pour faciliter l'élimination des bulles.
9.
Insérer le tube dans le néphélomètre BD BBL™ CrystalSpec™ ou BD PhoenixSpec™.
Vérifier que le tube est enfoncé aussi profondément que possible. (Consulter la notice qui
accompagne le néphélomètre BD BBL™ CrystalSpec™ ou BD PhoenixSpec™ pour en
connaître les instructions d'utilisation appropriées.)
10.
Si la densité d'inoculum a été fixée à 0,5 McFarland pour le type de galerie en cours
d'analyse, alors la plage de 0,50 à 0,60 est acceptable. Si la densité d'inoculum a été
fixée à 0,25 McFarland pour le type de galerie en cours d'analyse, alors la plage 0,20 à
0,30 est acceptable.
Si la densité des organismes est faible, des colonies provenant de l'isolat peuvent être
ajoutées. Re-vortexer l'échantillon et relire afin de confirmer que la turbidité de McFarland
correcte a été obtenue. Si la densité des organismes dépasse 0,6 McFarland, procéder
comme suit pour diluer le bouillon. Il est très important d'indiquer très précisément le
niveau de liquide dans le tube car ce volume est nécessaire pour remplir correctement les
puits dans la galerie.
a.
A l'aide d'un feutre, marquer le niveau de bouillon dans le tube sur-ensemencé de
bouillon ID BD Phoenix™.
b.
A l'aide d'une pipette stérile, ajouter, de manière aseptique, le bouillon ID
BD Phoenix™ frais à l'inoculum. Seul le bouillon ID BD Phoenix™ peut être utilisé
pour diluer l'inoculum.
c.
Agiter le tube au vortex et laisser reposer pendant 10 secondes.
d.
Placer le tube dans le néphélomètre et mesurer de nouveau la turbidité de la
suspension.
l
l
e.
A l'aide d'une pipette stérile, retirer, de manière aseptique, l'excès de bouillon
jusqu'au niveau initial indiqué par le repère marqué sur le tube à l'étape a.
Retirer l'excès de bouillon afin d'éviter de trop remplir la galerie. De même, ne pas
retirer trop de bouillon afin de disposer d'un volume suffisant pour remplir la galerie
comme il convient.
f.
Le bouillon peut maintenant être utilisé pour inoculer le bouillon AST BD Phoenix™
et/ou la galerie BD Phoenix™.
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Si la mesure est supérieure à 0,6, répéter les étapes b–d.
Si la mesure est comprise entre 0,5 et 0,6, passer à l'étape e.