Manuel d'utilisation du système automatisé de microbiologie BD Phoenix™ M50
En 1956, l'introduction d'un système micro-doseur (à boucle et compte-gouttes métalliques en
spirales, à précision étalonnée, permettant des dilutions précises), a rapidement permis à
Marymont et Wentz de développer un antibiogramme par dilutions en série.
micro-doseur était précis et permettait la réduction du volume des agents antimicrobiens. Le
terme microdilution apparut dans les années 1970 en référence aux tests CMI effectués sur
des volumes de 0,1 ml ou moins, de solution antibiotique.
2.3
Principes de la méthode
Nombre des test utilisés dans les galeries ID BD Phoenix™ sont des modifications des
méthodes classiques, telles que les tests de fermentation, d'oxydation, de dégradation et
l'hydrolyse des divers substrats. Par ailleurs, le système BD Phoenix™ utilise, pour
l'identification des organismes, des substrats chromogènes et fluorogènes, ainsi que des
substrats à source de carbone unique.
Le test AST de BD Phoenix™ constitue une version miniaturisée et modifiée de la méthode de
dilution double d'un micro-bouillon. Les antibiogrammes du système BD Phoenix™
s'effectuent par détermination de la croissance bactérienne en présence de l'antibiotique, à
divers niveaux de concentration, testé grâce à l'indicateur AST effectuant une lecture continue
des micro-puits en incubation constante des galeries BD Phoenix™.
2.3.1
Présentation du système ID/AST BD Phoenix™
L'instrument BD Phoenix™ M50 permet d'effectuer un maximum de 50 tests d'identification et
d'antibiogrammes simultanément, grâce à des galeries combo BD Phoenix™. Un plateau de
polystyrène moulé, scellé, auto-inoculant et pourvu de 136 micro-puits contenant des réactifs
déshydratés constitue la partie jetable de l'instrument BD Phoenix™. La galerie combo est
formée d'un côté ID, contenant des substrats déshydratés pour l'identification des bactéries ou
des levures, et d'un côté AST, contenant des concentrations variées d'antibiotiques, des
contrôles de croissance et de fluorescence dans des positions de puits appropriées. Le syst
ème BD Phoenix™ utilise, pour l'antibiogramme (AST), un indicateur d'oxydoréduction
colorimétrique optimisé et, pour l'identification (ID), divers indicateurs colorimétriques et
fluorimétriques. Le bouillon AST est ajusté en cation (par ex., Ca
les performances du test de sensibilité.
La galerie combo BD Phoenix™ est constituée d'un côté ID à 51 puits et d'un côté AST à
85 puits. Le côté ID contient 45 puits pourvus de substrats biochimiques déshydratés et 2 puits
de contrôle de fluorescence pour l'identification des bactéries ou des levures. Le côté AST
16
10, 11, 26–28
Figure 1 Exemple de galerie ID/AST
13
Le système
14
++
++
et Mg
) afin d'optimiser