Leica BIOSYSTEMS Kreatech FISH probes FGFR1 (8p11) – XL Mode D'emploi page 76

Kreatech FISH probes
Instruções de utilização: pré-tratamento e protocolos
As Kreatech FISH probes foram validadas com o BOND FISH kit,
reagentes adjuvantes BOND e o pré-tratamento padrão BOND e
protocolos de coloração ilustrados na Tabela 2. O protocolo final
pode variar de acordo com o tecido usado pelo utilizador. Todos os
desvios dos protocolos prescritos devem ser validados pelo utilizador.
Tabela 2: Protocolos para executar as Kreatech FISH probes
Secção protocolo
BOND
Staining – ISH
Detection
Prestaining –
Preparation
Prestaining – Heat
Pretreatment
Prestaining – Enzyme
Pretreatment
Prestaining – ISH
denaturation
Prestaining – ISH
detection
(1) Não é um protocolo predefinido. Para criar o protocolo HIER 25 min, consulte
"Protocolos" na sua documentação de utilizador BOND.
(2) Enzyme 5 deriva do Enzyme Concentrate 1 disponível no BOND Enzyme Pretreat-
ment Kit (AR9551). Consultar a secção Resolução de problemas abaixo para mais
detalhes.
Padrões de sinal
A FGFR1 (8p11) / SE 8 (D8Z1) – XL for BOND pode ser usada para
detetar amplificações que envolvam o gene FGFR1 em tecidos FFPE.
A sonda foi validada em tecidos NSCLC com os protocolos ilustrados
na tabela 2.
Nome protocolo
*FISH Protocol D
*Dewax
HIER 25 min com
ER2 (100)
(1)
*Enzyme 5 for 25 min
*D10
*ISH Hybridization
(12Hr)
Tipo protocolo
Pós-hibridização
Lavagem
Remoção de parafina
Pré-tratamento por
calor, recuperação de
epítopo
Digestão enzimática
(2)
Desnaturação 10 min.
Hybridização 12 hr.
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