Leica BIOSYSTEMS Kreatech FISH probes FGFR1 (8p11) – XL Mode D'emploi page 52

Kreatech FISH probes 53
Risoluzione dei problemi
Pretrattamento (sovradigestione): Le istruzioni per uso del BOND
Enzyme Pretreatment kit (AR9551) raccomandano una diluizione di 1
goccia di Enzyme Concentrate 1 in 7 ml di Diluent da registrare come
*Enzyme 1 nel software BOND.
Questo *Enzyme 1 potrebbe essere troppo forte se utilizzato in com-
binazione con HIER (Heat Induced Epitope Retrieval) e portare a una
sovradigestione del tessuto. Una diluizione secondaria dell'*Enzyme
1 (fino a una diluizione 1:300) è raccomandata, insieme a una regi-
strazione separata del reagente nel sistema BOND come *Enzyme
5, per evitare confusioni. Alternativamente, può essere utilizzata una
diluizione diretta fino a 1:3000 dell'Enzyme concentrate 1, al posto
della diluizione seriale di *Enzyme 1.
Diluizione della sonda e intensità del segnale: Si raccomanda per
l'uso una concentrazione finale 1x della sonda ma il bilanciamento
ottimale della sonda dipende da fattori come l'età del tessuto,
il fissaggio del tessuto, il protocollo di pretrattamento, oltre alle
preferenze personali. Le concentrazioni ottimali e i rapporti delle
sonde possono variare e devono essere determinati empiricamente
dall'utente finale.