Leica BIOSYSTEMS Kreatech FISH probes FGFR1 (8p11) – XL Mode D'emploi page 50

Kreatech FISH probes
Istruzioni per l'uso: Pretrattamento e protocolli
Le Kreatech FISH probes sono state convalidate usando il BOND FISH
kit, i reagenti ausiliari BOND e i protocolli pretrattamento e colorazio-
ne BOND predefiniti, mostrati nella Tabella 2. Il protocollo finale può
variare in base al tessuto utilizzato dall'utente. Qualsiasi devaizione
dai protocolli prescritti deve essere convalidata dall'utente.
Table 2: Protocolli predefiniti per l'impiego delle Kreatech FISH probes
Sezione del protocollo
BOND
Staining - ISH
Detection
Prestaining -
Preparation
Prestaining – Heat
Pretreatment
Prestaining – Enzyme
Pretreatment
Prestaining – ISH
denaturation
Prestaining – ISH
detection
(1) Non è un protocollo predefinito. Per la creazione del protocollo HIER da 25 minuti,
fare riferimento a "Protocolli" nella documentazione per l'utente BOND.
(2) L'enzima 5 è derivato da Enzyme Concentrate 1 disponibile nel BOND Enzyme
Pretreatment Kit (AR9551). Vedere più avanti la sezione Risoluzione dei problemi per
i casi particolari.
Schemi di segnale
La sonda FGFR1 (8p11) / SE 8 (D8Z1) – XL for BOND può essere usata per
rilevare le amplificazioni che interessano il gene FGFR1 nei tessuti FFPE.
La sonda è stata convalidata su tessuti NSCLC usando i protocolli mo-
strati nella tabella 2. La sonda FGFR1 (8p11) / SE 8 (D8Z1) – XL for BOND
Nome del protocollo
*FISH Protocol D
*Dewax
HIER 25 min with
ER2 (100)
(1)
*Enzyme 5 for 25 min
*D10
*ISH Hybridization
(12Hr)
Tipo di protocollo
Post-ibridazione
lavaggio
Rimozione della
paraffina
Pretrettamento
termico , Recupero
antigenico
Digestione enzimatica
(2)
Denaturazione 10 min.
Ibridazione 12 ore.
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