Leica BIOSYSTEMS Kreatech FISH probes FGFR1 (8p11) – XL Mode D'emploi page 64

Kreatech FISH probes 65
El reactivo de la sonda diluido/mezclado almacenado en un contene-
dor BOND se debe volver a conservar a una temperatura de 2 - 8 °C
tras haberlo procesado.
Tras la dilución de la sonda, las mezclas de sondas se mantienen
estables durante 30 días. Una vez transcurrido este periodo, la
mezcla diluida puede causar resultados incorrectos. No hay indicios
evidentes que indiquen la contaminación y/o la inestabilidad de la
sonda. El usuario debe verificar las condiciones de almacenamiento
diferentes a las indicadas anteriormente.
Solución de problemas
Pretratamiento (sobredigestión): en las instrucciones de uso del
BOND Enzyme Pretreatment kit (AR9551) se recomienda que se
registre una dilución de 1 gota de Enzyme Concentrate 1 en 7 ml de
Diluent como *Enzyme 1 en el software BOND.
Esta *Enzyme 1 puede ser demasiado potente para determinadas
muestras cuando se usa en combinación con Heat Induced Epitope
Retrieval (HIER) y tiene como consecuencia un tejido digerido en ex-
ceso. Se recomienda realizar una dilución secundaria de *Enzyme 1
(una dilución de hasta 1:300) y un registro independiente del reactivo
en el sistema BOND como *Enzyme 5 para evitar confusiones. Como
alternativa, se puede usar una dilución directa de hasta 1:3000 del
Enzyme concentrate 1 en lugar de la dilución sucesiva de *Enzyme 1.
Dilución de la sonda e intensidad de la señal: se recomienda una con-
centración final de la sonda 1 x, sin embargo, el equilibrio adecuado
de la sonda depende de factores como la edad y la fijación del tejido,
el protocolo de pretratamiento y las preferencias personales. Las
concentraciones óptimas y las relaciones de la sonda pueden variar,
y el usuario final las debe determinar de forma práctica.