Publicité
Les langues disponibles
Les langues disponibles
Ελαχιστοποιήστε τη μικροβιακή μόλυνση των αντιδραστηρίων, διότι ενδέχεται να συμβεί αύξηση μη ειδικής χρώσης.
Χρόνοι ή θερμοκρασίες επώασης διαφορετικές από εκείνες που καθορίζονται ενδέχεται να δώσουν εσφαλμένα αποτελέσματα. Τυχόν
τέτοιες μεταβολές πρέπει να επικυρώνονται από το χρήστη.
Ποιοτικός Έλεγχος
Τυχόν διαφορές στην επεξεργασία των ιστών και τις τεχνικές διαδικασίες στο εργαστήριο του χρήστη ενδέχεται να προκαλέσουν
σημαντική μεταβλητότητα στα αποτελέσματα, καθιστώντας αναγκαία την τακτική εκτέλεση εσωτερικών ελέγχων επιπλέον των ακόλουθων
διαδικασιών.
Οι μάρτυρες θα πρέπει να είναι φρέσκα δείγματα νεκροψίας/βιοψίας/χειρουργικά δείγματα, τα οποία είναι μονιμοποιημένα σε φορμόλη,
επεξεργασμένα και εγκλεισμένα σε κηρό παραφίνης, το συντομότερο δυνατό με τον ίδιο τρόπο με το(α) δείγμα(τα) του ασθενούς.
Θετικός Μάρτυρας Ιστού
Χρησιμοποιείται για να υποδεικνύει σωστά παρασκευασμένους ιστούς και σωστές τεχνικές χρώσης.
Θα πρέπει να περιλαμβάνεται ένας θετικός μάρτυρας ιστού για κάθε σύνολο συνθηκών εξέτασης σε κάθε εκτέλεση χρώσης.
Ένας ιστός με ασθενή θετική χρώση είναι πιο κατάλληλος από έναν ιστό με ισχυρή θετική χρώση για βέλτιστο έλεγχο ποιότητας και για
την ανίχνευση πολύ μικρών επιπέδων τυχόν αποδόμησης των αντιδραστηρίων.
2
Συνιστώμενος ιστός θετικού μάρτυρα είναι οι αμυγδαλές.
Εάν ο θετικός μάρτυρας ιστού δεν παρουσιάζει θετική χρώση, τα αποτελέσματα με τα δείγματα της εξέτασης θα πρέπει να θεωρούνται
άκυρα.
Αρνητικός Μάρτυρας Ιστού
Θα πρέπει να εξετάζεται μετά τον θετικό μάρτυρα ιστού για την επαλήθευση της ειδικότητας της επισήμανσης του αντιγόνου-στόχου από
το πρωτοταγές αντίσωμα.
Συνιστώμενος ιστός αρνητικού μάρτυρα είναι η γλώσσα.
Εναλλακτικά, η ποικιλία διαφόρων κυτταρικών τύπων που υπάρχουν στις περισσότερες τομές ιστών παρέχει συχνά θέσεις αρνητικού
μάρτυρα, αλλά αυτό πρέπει να επαληθεύεται από το χρήστη.
Μη ειδική χρώση, εάν υπάρχει, έχει συνήθως διάχυτη εμφάνιση. Ενδέχεται επίσης να παρατηρηθεί σποραδική χρώση του συνδετικού
ιστού σε τομές από ιστούς που έχουν μονιμοποιηθεί με υπερβολική ποσότητα φορμόλης. Χρησιμοποιείτε άθικτα κύτταρα για την
ερμηνεία των αποτελεσμάτων της χρώσης. Νεκρωτικά ή εκφυλισμένα κύτταρα παρουσιάζουν συχνά μη ειδική χρώση.
Ενδέχεται να
3
παρατηρηθούν ψευδώς θετικά αποτελέσματα λόγω μη ανοσολογικής δέσμευσης των πρωτεϊνών ή των προϊόντων αντίδρασης του
υποστρώματος. Ενδέχεται επίσης να προκληθούν από ενδογενή ένζυμα, όπως η ψευδοϋπεροξειδάση (ερυθροκύτταρα), η ενδογενής
υπεροξειδάση (κυτόχρωμα C) ή η ενδογενής βιοτίνη (π.χ. ήπαρ, μαστός, εγκέφαλος, νεφρός) ανάλογα με τον τύπο ανοσοχρώσης που
χρησιμοποιείται. Για τη διαφοροποίηση της ενδογενούς ενζυμικής δραστικότητας ή της μη ειδικής δέσμευσης των ενζύμων από ειδική
ανοσοαντιδραστικότητα, είναι δυνατό να χρωματιστούν αποκλειστικά επιπλέον ιστοί ασθενών με χρωμογόνο υποστρώματος ή ενζυμικά
σύμπλοκα (αβιδίνη-βιοτίνη, στρεπταβιδίνη, σημασμένο πολυμερές) και υπόστρωμα-χρωμογόνο, αντίστοιχα. Εάν παρουσιαστεί ειδική
χρώση στον αρνητικό μάρτυρα ιστού, τα αποτελέσματα με τα δείγματα ασθενούς θα πρέπει να θεωρούνται άκυρα.
Αρνητικός Μάρτυρας Αντιδραστηρίου
Χρησιμοποιείτε έναν μη ειδικό αρνητικό μάρτυρα αντιδραστηρίου αντί του πρωτοταγούς αντισώματος με μια τομή κάθε δείγματος
ασθενούς για την αξιολόγηση μη ειδικής χρώσης και για να επιτρέπεται καλύτερη ερμηνεία της ειδικής χρώσης στη θέση του αντιγόνου.
Ιστός Ασθενούς
Εξετάστε τελευταία τα δείγματα ασθενούς που έχουν χρωματιστεί με το NCL-L-CD71-309. Η ένταση της θετικής χρώσης θα πρέπει να
εκτιμάται στα πλαίσια τυχόν μη ειδικής χρώσης υποβάθρου του αρνητικού μάρτυρα αντιδραστηρίου. Όπως συμβαίνει με οποιαδήποτε
ανοσοϊστοχημική εξέταση, ένα αρνητικό αποτέλεσμα σημαίνει ότι το αντιγόνο δεν ανιχνεύτηκε, όχι ότι το αντιγόνο δεν υπήρχε στα
κύτταρα/στον ιστό που εξετάστηκε. Εάν είναι απαραίτητο, χρησιμοποιήστε μια σειρά αντισωμάτων για την αναγνώριση ψευδώς
αρνητικών αντιδράσεων.
Αναμενόμενα Αποτελέσματα
Φυσιολογικοί ιστοί
Ο κλώνος 10F11 ανίχνευσε την πρωτεΐνη CD71 στο κυτταρόπλασμα (κοκκιώδες) και στη μεμβράνη των πρόδρομων κυττάρων
της ερυθράς σειράς στον μυελό των οστών, των επιθηλιακών κυττάρων του ειλεού, του τυφλού εντέρου, του κόλου, του ορθού, του
ενδομητρίου, των σαλπίγγων και του στομάχου. Χρώση παρατηρήθηκε επίσης στα εξωκρινή κύτταρα του παγκρέατος, στα φλοιώδη
κύτταρα των επινεφριδίων, στα περιφερικά νεφρικά σωληνάρια, στα πυραμιδικά κύτταρα εντός του εγκεφαλικού φλοιού, στα κύτταρα
του Purkinje και στα αιμοφόρα αγγεία της παρεγκεφαλίδας, στα αιμοφόρα αγγεία των βασικών γαγγλίων και στους νευρώνες στον
ιππόκαμπο. Προκάλεσε επίσης χρώση στους καρδιακούς μύες, του σκελετικούς μύες, τα βλαστικά κέντρα των αμυγδαλών, στα
ηπατοκύτταρα, στις τροφοβλάστες του πλακούντα, στα κυψελιδικά μακροφάγα και στους πόρους εντός της παρωτίδας. Χρώση
παρατηρήθηκε επίσης σε ένα ποσοστό λεμφοειδών κυττάρων στον σπλήνα και στα μακροφάγα των λεμφαδένων. (Συνολικός αριθμός
φυσιολογικών περιστατικών που αξιολογήθηκαν = 56).
Ανώμαλη ιστού
Ο κλώνος 10F11 προκάλεσε χρώση σε 4/4 ηπατικούς όγκους (στους οποίους συγκαταλέγονταν 2/2 ηπατοκυτταρικά καρκινώματα,
1/1 χολλαγγειοκαρκινώμα και 1/1 μεταστατικό καρκίνωμα), 4/4 όγκους των ωοθηκών (στους οποίους συγκαταλέγονταν 1/1 κακοήθης
όγκος βλαστικών κυττάρων, 1/1 ορώδες κυσταδενοκαρκίνωμα, 1/1 διαυγοκυτταρικό καρκίνωμα και 1/1 διηθητικό ακανθοκυτταρικό
καρκίνωμα), 3/4 όγκους των πνευμόνων (στους οποίους συγκαταλέγονταν 1/1 μη μικροκυτταρικό καρκίνωμα, 1/1 ακανθοκυτταρικό
καρκίνωμα και 1/1 μεγαλοκυτταρικό καρκίνωμα και 0/1 αδενοκαρκίνωμα), 2/4 θηλώδη καρκινώματα του θυρεοειδούς, 2/2 διηθητικά
πορογενή καρκινώματα του μαστού, 2/2 γαστρικά αδενοκαρκινώματα, 2/2 ακανθοκυτταρικά καρκινώματα της γλώσσας,
2/2 ακανθοκυτταρικά καρκινώματα του οισοφάγου, 2/2 ακανθοκυτταρικά καρκινώματα του τραχήλου της μήτρας, 2/2 σεμινώματα,
2/2 αδενοκαρκινώματα του κόλου, 2/2 αδενοκαρκινώματα του ορθού, 1/2 όγκους του εγκεφάλου (στους οποίους συγκαταλέγονταν
1/1 θήλωμα χοριοειδούς πλέγματος και 0/1 αναπλαστικό αστροκύττωμα), 1/2 μεταστατικούς όγκους άγνωστης προέλευσης,
1/2 καρκινώματα νεφρικών κυττάρων, 1/2 όγκους του δέρματος (στους οποίους συγκαταλέγονταν 1/1 ακανθοκυτταρικό καρκίνωμα και
0/1 δερματοϊνοσάρκωμα) και 1/1 ακανθοκυτταρικό καρκίνωμα του λάρυγγα. Δεν παρατηρήθηκε χρώση σε όγκους του θύμου (0/1) και
σε όγκους μαλακών μορίων (0/2). (Συνολικός αριθμός περιστατικών όγκων που αξιολογήθηκαν = 44).
Το NCL-L-CD71-309 συνιστάται για την ανίχνευση της πρωτεΐνης CD71 σε φυσιολογικό και νεοπλασματικό ιστό, ως
συμπλήρωμα της συμβατικής ιστοπαθολογίας χρησιμοποιώντας μη ανοσολογικές ιστοχημικές χρώσεις.
CD71-309
Page 24
Publicité
