Paramètres Des Mesures Protéine A280; Paramètres De Protéine A280 - Thermo Scientific NanoDrop One Manuel De L'utilisateur

Mesure Protéine A280
Paramètres des mesures Protéine A280
Pour afficher les paramètres de Protéine A280 depuis l'écran de mesure de Protéine A280,
appuyez sur
Paramètres de Protéine A280
L'application Protéine A280 fournit tout un éventail d'options de types d'échantillon pour
l'analyse des protéines purifiées.
Chaque type d'échantillon applique un unique coefficient d'extinction aux calculs de
protéines. Si le coefficient d'extinction de l'échantillon est connu, choisissez l'option
(molaire) ou
ou choisissez l'option qui correspond le mieux à la solution d'échantillon. Si vous n'avez
besoin que d'une estimation approximative de la concentration et ignorez le coefficient
d'extinction de l'échantillon, sélectionnez l'option de type d'échantillon 1 Abs=1 mg/ml.
Paramètre Options disponibles
Type 1 Abs = 1 mg/mL
a
d'échantillon
Sérum albumine bovine
(BSA)
IgG
64 Manuel de l'utilisateur du NanoDrop One
> Paramétrage Protéine A280.
ε
1 % (de masse) et saisissez la valeur. Sinon, calculez le coefficient d'extinction
Conseil de manière idéale, le coefficient d'extinction devrait être déterminé de manière
empirique en utilisant une solution de la protéine à l'étude d'une concentration connue
utilisant le même tampon.
Coefficient d'ext. de
masse (l/gm-cm)
Référence générale
6,67
13,7
Description
Recommandé lorsque le coefficient d'extinction est
inconnu et qu'une estimation approximative de la
concentration en protéines est acceptable pour une
solution dépourvue d'autres substances interférant.
Assume qu'une solution de protéines de 0,1 %
(1 mg/ml) produit 1,0 A à 280 nm (avec une longueur
de trajet optique de 10 mm), soit :
Calcule la concentration en protéine BSA (Sérum
albumine bovine) en utilisant un coefficient d'extinction
ε
de masse ( ) de 6,67 l/gm-cm à 280 nm pour une
solution de BSA de 1 % (soit 10 mg/ml). Si l'on assume
que le PM est de 66 400 daltons (Da), le coefficient
d'extinction molaire à 280 nm pour la BSA est
d'approximativement 43 824 M
Adapté à la plupart des anticorps mammifères
(c'est-à-dire pour l'immunoglobuline G ou IgG).
Calcule la concentration protéique en utilisant un
coefficient d'extinction de masse (
280 nm pour une solution d'IgG à 1 % (c'est-à-dire
10 mg/ml). Si l'on assume que le PM est de 150 000 Da,
le coefficient d'extinction molaire à 280 nm pour l'IgG
est d'approximativement 210 000 M
ε
+ PM
ε
1 % = 10.
-1 -1
cm .
ε
) de 13,7 l/gm-cm à
-1 -1
cm .
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