Thermo Scientific NanoDrop One Manuel De L'utilisateur page 27

Les applications de dosage d'acides nucléiques utilisent
une modification de l'équation de Beer-Lambert
(ci-contre à droite) pour calculer la concentration d'un
échantillon dans laquelle le coefficient d'extinction et la
longueur du trajet optique sont combinés en un
« facteur ».
Pour les applications ADNdb, ADNsb et ARN,
les facteurs généralement acceptés pour les acides
nucléiques sont utilisés en conjonction avec la Loi de
Beer pour calculer la concentration des échantillons.
Pour l'application Facteur personnalisé, le facteur
spécifié par l'utilisateur est utilisé.
Thermo Scientific
Comparaison entre coefficients d'extinction et facteurs
En utilisant l'équation de Beer-Lambert, le facteur (f ) est défini comme
suit :
ε
facteur (f) = 1/(
Où :
ε
= coefficient d'extinction molaire dépendant de la longueur d'onde
en ng-cm/μl
b = longueur du trajet optique de l'échantillon en cm
Résultat, la concentration d'analyte (c) est calculée comme suit :
ε
c = A * [1/( * b)]
ou
c = A * f
Où :
c = concentration d'analyte en ng/μl
A = absorbance en unités d'absorbance (A)
f = facteur en ng-cm/μl (voir ci-dessous)
Facteurs utilisés
• ADNdb (facteur = 50 ng-cm/μl)
• ADNsb(facteur = 33 ng-cm/μl)
• ARN (facteur = 40 ng-cm/μl)
• Facteur personnalisé (facteur saisi par l'utilisateur compris entre
15 ng-cm/μl et 150 ng-cm/μl)
Manuel de l'utilisateur du NanoDrop One
Mesure ADNdb, ADNsb ou ARN
* b)
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