Paramètres - Thermo Scientific NanoDrop One Manuel De L'utilisateur

Mesure Oligo ADN ou Oligo ARN
Les concentrations d'acides nucléiques calculées sont
basées sur la valeur d'absorbance à 260 nm, le facteur
utilisé et la longueur du trajet optique de l'échantillon.
Une correction de la ligne de base en un point unique
(ou correction de l'analyse) peut aussi être appliquée.
La concentration est exprimée en unités de masse.
Sur Internet, des calculateurs permettent de convertir la
concentration exprimée en unités de masse en unités
molaires sur la base de la séquence de l'échantillon.
Les valeurs d'absorbance à 260 nm, 280 nm et parfois
230 nm sont utilisées pour calculer les rapports de
pureté pour les échantillons d'acides nucléiques
mesurés. Les rapports de pureté sont sensibles à la
présence de contaminants dans l'échantillon,
notamment aux résidus des solvants et réactifs
normalement utilisés pendant la purification des
échantillons.
54 Manuel de l'utilisateur du NanoDrop One
Valeurs mesurées
Absorbance A260
Remarque : Pour les mesures d'absorbance de micro-volumes et les
mesures prises avec des cuvettes non standard (de dimensions autres que
10 mm), les spectres sont normalisés à l'équivalent d'une longueur de trajet
optique de 10 mm.
• Les valeurs d'absorbance des acides nucléiques sont mesurées à 260 nm
en utilisant le spectre normalisé. Il s'agit de la valeur A260 rapportée si
Correction de la ligne de base n'est pas sélectionné.
• Si Correction de la ligne de base
à la longueur d'onde de correction est soustraite de l'absorbance de
l'échantillon à 260 nm. L'absorbance corrigée à 260 nm est rapportée
et utilisée pour calculer la concentration en acides nucléiques.
Absorbance A230, A280
• Les valeurs d'absorbance normalisées à 230 nm, 260 nm et 280 nm
sont utilisées pour calculer les rapports A260/A230 et A260/A280.
Longueur du trajet optique de l'échantillon
• Pour les mesures de micro-volumes, le logiciel sélectionne la longueur
de trajet optique optimale (entre 1,0 mm et 0,03 mm) sur la base de
l'absorbance de l'échantillon à la longueur d'onde de l'analyse.
• Pour les mesures avec une cuvette, la longueur du trajet optique est
déterminée par le paramètre Longueur du trajet optique de la cuvette
dans le logiciel (reportez-vous à
• Les spectres et les valeurs d'absorbance affichés sont normalisés à
l'équivalent d'une longueur de trajet optique de 10 mm.
est sélectionné, la valeur d'absorbance
Paramètres généraux).
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