Calculs Pour Les Mesures Avec Protéine A205 - Thermo Scientific NanoDrop One Manuel De L'utilisateur

Calculs pour les mesures avec Protéine A205
Comme d'autres applications relatives aux protéines,
Protéines A205 utilise l'équation de Beer-Lambert
corréler l'absorbance avec la concentration sur la base
du coefficient d'extinction et de la longueur du trajet
optique de l'échantillon.
Cette application offre trois options (indiquées ci-contre)
pour sélectionner un coefficient d'extinction approprié
pour chaque échantillon mesuré, à utiliser en conjonction
avec la Loi de Beer pour calculer la concentration de
l'échantillon.
Si le coefficient d'extinction de l'échantillon est connu,
ε
choisissez l'option 1 % (massique) et saisissez la
valeur. Sinon, calculez le coefficient d'extinction ou
choisissez l'option qui correspond le mieux à la solution
d'échantillon.
Conseil : de manière idéale, le coefficient d'extinction
devrait être déterminé de manière empirique en utilisant
une solution de la protéine à l'étude d'une concentration
connue utilisant le même tampon.
Les concentrations protéiques calculées sont basées
sur la valeur d'absorbance à 205 nm, le coefficient
d'extinction sélectionné (ou saisi) et la longueur du trajet
optique de l'échantillon. Une correction de la ligne de
base en un point unique peut aussi être appliquée.
La concentration est exprimée en unités de masse.
Sur Internet, des calculateurs permettent de convertir la
concentration exprimée en unités de masse en unités
molaires sur la base de la séquence de l'échantillon.
Thermo Scientific
Options disponibles pour le coefficient d'extinction
pour
• 31, assume que
• Domaines d'application, assume que
27 + 120 * (A280/A205)
• Autre protéine, saisissez le coefficient d'extinction de masse en
l/gm-cm pour une solution protéique à 1 mg/ml (
Remarque : Pour plus d'informations, reportez-vous à
Valeurs mesurées
Absorbance A205
Remarque : Pour les mesures d'absorbance de micro-volumes et les
mesures prises avec des cuvettes non standard (de dimensions autres que
10 mm), les spectres sont normalisés à l'équivalent d'une longueur de trajet
optique de 10 mm.
• Les valeurs d'absorbance des protéines sont mesurées à 205 nm en
utilisant le spectre normalisé. Si Correction de la ligne de base n'est pas
sélectionné, il s'agit de la valeur A205 rapportée et de la valeur utilisée
pour calculer la concentration protéique.
• Si Correction de la ligne de base
normalisée et corrigée en fonction de la ligne de base à 205 nm est
rapportée et utilisée pour calculer la concentration protéique.
Absorbance A280
• La valeur d'absorbance normalisée et corrigée en fonction de la ligne de
base à 280 nm est également rapportée.
Mesure Protéine A205
ε
0,1 % (1 mg/ml) à 205 nm = 31
ε
0,1 % (1 mg/ml) à 205 nm =
est sélectionné, la valeur d'absorbance
Manuel de l'utilisateur du NanoDrop One
ε
0,1 %).
Type d'échantillon.
93