Thermo Scientific NanoDrop One Manuel De L'utilisateur page 77

L'équation ci-contre à droite montre la relation entre le
coefficient d'extinction molaire (
ε
d'extinction en pourcentage (
Pour déterminer la concentration (c) d'un échantillon en
mg/ml, utilisez l'équation ci-contre à droite et un facteur
de conversion de 10.
Conseil : Le logiciel NanoDrop One inclut le facteur de
conversion quand il indique les concentrations de
protéines.
Thermo Scientific
ε
) et le coefficient
molaire
1 %).
ε
Conversions entre
molaire
ε ε
( ) * 10 = (
molaire
Exemple : Pour déterminer le coefficient d'extinction de la solution en
ε
pourcentage ( 1 %) pour une protéine qui a un coefficient d'extinction
-1
molaire de 43 824 M cm
66 400 daltons (Da), réarrangez et résolvez l'équation ci-dessus
comme suit :
ε ε
1 % = ( * 10) / (PM
molaire
ε
1% = (43 824 * 10) / 66 400 Da)
ε
1% = 6,6 g/100 ml
Conversions entre les g/100 ml et les mg/ml
C en mg/ml = (A /
protéine
Exemple : Si l'absorbance mesurée pour un échantillon de protéines à
280 nm relativement à la référence est de 5,8 A, la concentration en
protéines peut être calculée comme suit :
ε
C = (A / 1 %) * 10
protéine
C = (5,8/6,6 g/100 ml) * 10
protéine
C = 8,79 mg/ml
protéine
Manuel de l'utilisateur du NanoDrop One
Mesure Protéine A280
ε
et 1 %
1 %) * (PM )
protéine
-1
et un poids moléculaire (PM) de
)
protéine
ε
1%) * 10
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