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Mesure Protéine Bradford
Pour maximiser la fiabilité avec le dosage Protéine Bradford :
Kits et protocoles de dosage de protéines
Reportez-vous au site Internet du NanoDrop pour les kits et les protocoles à jour pour les
instruments NanoDrop One. Suivez les recommandations du fabricant du kit de dosage pour
tous les étalons et échantillons (inconnus). Veuillez à ce que chacun de ceux-ci soit soumis à la
même synchronisation et à la même température pendant tout le dosage.
Les étalons de protéines permettant de générer une courbe d'étalonnage peuvent aussi être
fournis par le fabricant du kit. Étant donné que les socles du NanoDrop One peuvent mesurer
des concentrations protéiques plus élevées que les spectrophotomètres à cuvette traditionnels,
il est possible que vous deviez fournir vos propres étalons de protéines de concentrations plus
élevées que ceux fournis par le fabricant. Par exemple, des étalons supplémentaires peuvent
être nécessaires pour assurer que la courbe d'étalonnage couvre la gamme dynamique du
dosage et la gamme attendue des échantillons inconnus.
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Manuel de l'utilisateur du NanoDrop One
• Travaillez rapidement et ne laissez pas les étalons ou les échantillons sédimenter plus
longtemps que nécessaire. Les agrégats colorant Coomassie-colorant et colorant
Coomassie-protéine peuvent former des particules avec un temps de développement
croissant, ce qui résultera en des fluctuations significatives des lectures d'absorbance.
• Mesurez les étalons et les échantillons en triplicat en utilisant une nouvelle aliquote
pour chaque mesure. Pour les mesures avec un socle, le signal de l'analyte total
(protéine-colorant) à 595 nm est limité à environ 0-0,150 A à cause de la longueur du
trajet optique de 1,0 mm du socle, de la concentration en bleu de Coomassie et du
pH acide.
Remarque Si vous avez un instrument du modèle NanoDrop One
cuvette résultera en un signal d'absorbance plus élevé.
C
, utiliser l'option
Thermo Scientific
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