Agilent Technologies ZORBAX Guide D'utilisation
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ZORBAX reversed-phase / 反相 / à phase reversa / Umkehrphase / Fase inversa /
Fase inversa / 逆相 / Fase reversa / обращённо-фазной
HPLC phases / 相 / Phases HPLC / Phasen / Fasi / Fases /カラム / Fases / фазной
Poroshell 120/300 / Pursuit / Polaris / HC-C18(2) / TC-C18(2)

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Manuels Connexes pour Agilent Technologies ZORBAX

Sommaire des Matières pour Agilent Technologies ZORBAX

  • Page 1 обращённо-фазной ВЭЖХ Agilent Guia rápido para as colunas Agilent de fase reversa ZORBAX reversed-phase / 反相 / à phase reversa / Umkehrphase / Fase inversa / Fase inversa / 逆相 / Fase reversa / обращённо-фазной HPLC phases / 相 / Phases HPLC / Phasen / Fasi / Fases /カラム / Fases / фазной...

  • Page 2: Getting Started

    This booklet provides general information for all ZORBAX, Poroshell, Pursuit, and Polaris reversed-phase columns. For additional detailed information about your specific phase or family, see: agilent.com/chem/columnchoices Getting started A QC Column Performance Report, including a test chromatogram, is enclosed with every Agilent column. The QC test system has been modified from a standard system to minimize system dead volume, so it may vary from the system used in your lab.
  • Page 3 • The direction of flow is marked on the column. • 1.8 µm columns (ZORBAX RRHT, ZORBAX RRHD) can only be operated in the direction flow marked on the column. • Agilent recommends using Polyketone fittings (5042-8957) for columns up to 600 bar, and A-Line Quick Connect assembly (5067-5961 for 0.075 x 105 mm) or Quick Turn Fitting (5067-5966) for columns that...
  • Page 4 (see next page). Expect reduced lifetime when operating outside the recommended pH and temperature ranges. If you are using Poroshell 120 or ZORBAX RRHT or RRHD columns, 1.8 µm, consider using a Fast Guard for UHPLC to protect your analytical column.
  • Page 5 ENGLISH Column operating Parameters: pH and Temperature Phase recommended maximum operating pH range temperature ZORBAX Eclipse Plus C18 pH 2.0 to 9.0 60 °C and C8, Eclipse XDB-C8, XDB-C18, XDB-Phenyl, Poroshell 120 EC-C18 and EC-C8, ZORBAX Bonus-RP, HC-C18(2) and TC-C18(2) Poroshell HPH pH 2.0 to 11.0...
  • Page 6 2.7 µm, 4 µm 600 bar (Poroshell 120) (9000 psi) Poroshell 300 5 µm 400 bar (6000 psi) All ZORBAX, Pursuit, and 3.0 µm, 3.5 µm, 400 bar Polaris columns, not noted as 5 µm (6000 psi) RRHT or RRHD, and HC-C18(2), TC-C18(2)
  • Page 7 5% methanol or acetonitrile initially and 100% columns methanol or acetonitrile as the final solvent. ZORBAX Eclipse PAH* 30 or 40% acetonitrile initially, to 100% acetonitrile as final solvent. It may be necessary to cool column to 15 to 20 °C for improved resolution.
  • Page 8 The inlet frit on columns with a particle size of 2.7 µm or greater has a nominal porosity of 2 µm. Samples that contain particulate matter will plug the column inlet frit. ZORBAX and Fast Guard columns and hardware kits (as required) are recommended for use with such samples, and are gener- ally recommended for all column use.

  • Page 9: Storage Recommendations

    ENGLISH storage recommendations Long-term storage of silica-based, bonded phase columns should be in a pure organic solvent. If the column has previously been used with a buffered mobile phase, the buffer should first be removed by purging the column with 20 to 30 column volumes of a 50:50 mixture of methanol or acetonitrile and water, followed by 20 to 30 column volumes of the pure solvent.
  • Page 10 Tips for Getting the Best Chromatographic results • Optimize your instrument by minimizing tubing lengths between components, to reduce extra column volume and band broadening. Use 0.12 mm id red tubing for Fast LC/high efficiency columns. Learn about capillary options at agilent.com/chem/lccapillaries • Ensure the data collection rate is optimized for your column.
  • Page 11 中文 本小册子提供适用于所有 ZORBAX, Poroshell, Pursuit, 和 Polaris 反相色谱柱的一般信息。 有关特定固定相或产品系列的 详细信息，请访问： agilent.com/chem/columnchoices 入门指南 每个 Agilent 色谱柱都附带一个 QC 色谱柱性能报告，该报告 包含一个测试色谱图。QC 测试系统是在标准系统基础上改 装而成的，它具有相对较低的系统死体积，因此，它与实验 室中使用的系统不同。这样可以更好地评估色谱柱并确保获 得更一致的产品。正确配置的 LC 系统将生成与 QC 性能报 告中的色谱图相似的结果。 现代色谱柱都很耐用，在正常的色谱条件下，可以使用很长 时间。在合适的条件下使用可以最大化色谱柱寿命。在应用 方法之前请务必检阅色谱柱使用条件。...
  • Page 12 使用色谱柱 安装 • 在色谱柱上标明了流向。 • 只能按色谱柱上标记的流向操作 1.8 µm 色谱柱 (ZORBAX RRHT, ZORBAX RRHD)。 • 安捷伦建议对最高耐压为 600 bar 的色谱柱使用聚酮接头 (5042-8957), 对将在 UHPLC 压力下操作的色谱柱使用 A-Line Quick Connect 组件 (5067-5961, 0.075 x 105 mm) 或 Quick Turn Fitting 接头 (5067-5966). 请确保订购适用于相应接头的 毛细管连接。如需了解更多信息，请访问 www.agilent.com/chem/a-linefittings.
  • Page 13 在尝试去除柱前筛板堵塞物时（请参见 “色谱柱维护” ） 。 • 始终使用高纯度试剂和色谱级溶剂来准备流动相。在使 用之前对所有流动相进行脱气和过滤。 • 打开色谱柱会降低色谱柱性能。 • 新色谱柱包含有机溶剂和水的混合物。请参见 QC 性能报 告， 了解色谱柱中的溶剂成分。开始时，应小心不要让任 何可能导致形成沉淀的流动相通过色谱柱。 • Agilent 反相色谱柱与水和所有常见的有机溶剂兼容 • 建议使用预柱来保护色谱柱并延长其使用寿命。 • 在不使用色谱柱时，不能在高的 pH 或高的温度条件 下保存色谱柱。 • 避免在超出建议的色谱柱相应的 pH 范围的条件下使用此 色谱柱（请参见下一页） 。在超出建议的 pH 和温度范围 条件下操作会缩短其使用寿命。 如果您正在使用Poroshell 120 或者ZORBAX RRHT或RRHD色 谱柱，请使用Fast Guard ，访问 agilent.com/chem/fastguards获取更多信息。...
  • Page 14 色谱柱操作温度：pH 和温度 建议的 pH 键合相 最高操作温度 范围 60 °C ZORBAX Eclipse Plus C18 pH 2.0 至 9.0 和 C8, Eclipse XDB-C8, XDB-C18, XDB-Phenyl, Poroshell 120 EC-C18 和 EC-C8, ZORBAX Bonus-RP, HC-C18 (2), TC-C18(2) Poroshell HPH pH 2.0 至 11.0 60 °C ZORBAX Extend C18 pH 2.0 至...
  • Page 15 2.7 µm, 4 µm 600 bar (Poroshell 120) (9000 psi) Poroshell 300 5 µm 400 bar (6000 psi) 所有 ZORBAX, Pursuit, 和 3.0 μm, 3.5 μm, 400 bar Polaris, 色谱柱，未记录为 5 μm (6000 psi) RRHT 或 RRHD，以及 HC-C18(2), TC-C18(2) 流动相选择和操作温度...
  • Page 16 建议的梯度初始比例 固定相 用法说明 最初为 5% 甲醇或乙腈，100% 甲醇或 大多数反相色谱柱 乙腈作为最终溶剂。 ZORBAX Eclipse PAH* 最初为 30 或 40% 乙腈，至 100% 乙 腈作为最终溶剂。要提高分离度，可 能需要将色谱柱冷却至 15 至 20 °C。 ZORBAX Bonus-RP 与传统的长链烷基固定相相比，化合 物洗脱需要使用浓度较低的有机流动 相改性剂。 大分子色谱柱（如 多肽、蛋白质、DNA 片断等的分离通 Poroshell 300, ZORBAX 常使用三氟醋酸或甲酸改性剂以进行 300SB色谱柱） pH 控制和／或作为离子对添加剂，以...
  • Page 17 空隙是 2 µm。样品中包含颗粒物将堵塞色谱柱进口筛板。要 使用此类样品，建议使用 ZORBAX 和 Fast Guard 预柱（如果需 要），在使用所有色谱柱时，通常也建议使用这些预柱。 有关保护色谱柱的详细信息，请访问 agilent.com/chem/fastguards 清洁您的色谱柱/延长色谱柱使用寿命 对于可以进行反冲的色谱柱（Poroshell 120、颗粒尺寸大于 1.8 µm 的 ZORBAX 色谱柱和所有 Pursuit 和 Polaris 色谱柱） ， 请用强洗脱度，较小极性的溶剂开始清洗。 1. 断开色谱柱与检测器的连接，然后把柱后废液导入烧 杯。 2. 从你所使用的流动相开始清洗（但必须去除缓冲盐） 。 按 10 到 20 色谱柱体积量注入。 3. 下一步，使用 100% 有机相（甲醇或乙腈） 。...
  • Page 18 存放建议 硅胶基质键合相色谱柱应在纯有机溶剂中进行长期存放。 如果色谱柱已使用了含缓冲盐的流动相，应首先使用甲醇 或乙腈和水的 50:50 混合物对色谱柱进行 20 至 30 个色谱柱 体积的冲洗，然后使用纯溶剂进行 20 至 30 个色谱柱体积的 冲洗。在存放之前，应使用堵头堵住接头，以防止填充物变 干。将色谱柱放在大多数流动相中可安全存放较短时间。为 了保护设备，需要使用不含缓冲液的相同的流动相对色谱柱 进行冲洗，以从仪器和色谱柱中去除盐分（例如， 使用 60:40 ACN/H 0 去除 60:40 ACN/0.02 M 磷酸盐缓冲的流动相） 。在使 用此方法时， 可使用原始流动相快速进行重新平衡， 并消除了被盐分腐蚀的危险。...
  • Page 19 中文 获得最佳色谱结果的提示 • 尽可能缩短组件之间管线的长度，以减少柱外体积和谱 带扩展，从而优化仪器。对快速 LC/高效色谱柱，请使用 内径为 0.12 毫米的红色管线。有关毛细管选件，请访问 agilent.com/chem/lccapillaries • 确保针对色谱柱优化数据采集速率。对快速 LC 色谱柱 (Poroshell 120, RRHT, RRHD) 使用较高的采集速率。 • 根据样品使用适当的样品过滤或其他样品准备方法。要 了解详细信息，请访问 agilent.com/chem/sampleprep • 在 LC 检测器中使用 Agilent 认证的紫外灯， 以获得最佳性能。...

  • Page 20: Mise En Route

    Ce livret fournit des informations générales relatives à toutes les colonnes ZORBAX, Poroshell, Pursuit, et Polaris à phase inverse. Pour obtenir des informations supplémentaires plus détaillées relatives à votre phase ou à votre famille en particulier, visitez le site : agilent.com/chem/columnchoices...
  • Page 21 • La direction du flux est indiquée sur la colonne. • les colonnes 1.8 μm (ZORBAX RRHT, ZORBAX RRHD) ne peuvent être utilisées que dans la direction du flux indiquée sur la colonne. • Agilent recommande d’utiliser les raccords de colonne en polycétone (5042-8957) pour des pressions jusqu’à...

  • Page 22: Autres Conseils D'utilisation

    • Du fait de la petite taille des particules, le matériau à l’intérieur des colonnes peut être inhalé lorsqu’il est sec. Les colonnes ne doivent être desserties que dans une zone bien ventilée • Veuillez observer les limites de pression opérationnelle indiquées pour chaque colonne (voir le graphique).
  • Page 23 FRANÇAIS Paramètres opérationnels de la colonne : pH et température Phase Gamme pH Température recommandée opération-nelle maximum ZORBAX Eclipse Plus C18 pH 2.0 à 9.0 60 °C et C8, Eclipse XDB-C8, XDB-C18, XDB-Phényl, Poroshell 120 EC-C18 et EC-C8, ZORBAX Bonus-RP,...
  • Page 24 600 bar (Poroshell 120) (9000 psi) Poroshell 300 5 µm 400 bar (6000 psi) Toutes les colonnes ZORBAX, 3.0 μm, 3.5 μm, 400 bar Pursuit, et Polaris, non 5 μm (6000 psi) marquées comme RRHT ou RRHD et HC-C18(2), TC-C18(2) sélection de la phase mobile et températures de...

  • Page 25: Gradients De Départ Recommandés

    *La plus longue durée de vie est obtenue à < 40 °C. Si vous utilisez une colonne Poroshell 120, ou ZORBAX RRHT ou RRHD 1.8 µm, pensez à la protéger grâce à une colonne de garde Fast Guard pour UHPLC. Consultez le site...
  • Page 26 Pour les colonnes qui peuvent rincées à l’envers (colonnes Poroshell 120, ZORBAX avec des particules de >1.8 μm et toutes les colonnes Pursuit et Polaris), démarrez avec un solvant plus fort (moins polaire). 1. Débranchez la colonne du détecteur. La phase mobile sortant de la colonne sera récupérée dans un bécher.

  • Page 27: Recommandations De Stockage

    FRANÇAIS recommandations de stockage Le stockage à long terme des colonnes à phase greffée et à base de silice doit se faire dans un solvant organique pur. En cas d’utilisation préalable de la colonne avec une phase mobile tamponnée, le tampon doit d’abord être éliminé...

  • Page 28: Conseils D'obtention Des Meilleurs Résultats Chromatographiques

    Conseils d’obtention des meilleurs résultats chromatographiques • Optimisez votre instrument en minimisant les longueurs de tubes entre les différents modules, afin de réduire les volumes “extra-colonne” et l’élargissement de la bande d’échantillon. Utilisez du tube PEEK rouge de 0.12 mm de di pour les colonnes en « Fast LC »/efficacité élevée. Pour en savoir plus sur les différents tubes capillaires disponibles, consultez le site agilent.com/chem/lccapillaries • Vérifiez que la vitesse d’acquisition des données est optimisée pour votre...

  • Page 29: Erste Schritte

    DEUTSCH Dieses Handbuch enthält allgemeine Informationen zu allen ZORBAX-, Poroshell-, Pursuit- und Polaris- Umkehrphasensäulen. Genauere Informationen über Ihre Säulenphase finden Sie unter: agilent.com/chem/columnchoices erste schritte Zu jeder Agilent Säule gibt es einen QC-Säulentestreport mit Testchromatogramm. Bei dem QC-Testsystem handelt es sich um ein optimiertes Standardsystem, um das Totvolumen im System zu minimieren.

  • Page 30: Wichtige Sicherheitshinweise

    Verwenden ihrer säule installation • Die Flussrichtung ist auf der Säule angegeben. • 1.8-μm-Säulen (ZORBAX RRHT, ZORBAX RRHD) können nur in der auf der Säule angegebene Flussrichtung verwendet werden. • Agilent empfiehlt Polyketon-Fittings (5042-8957) für Säulen bis zu 600 bar und A-Line Quick Connect Einheiten (5067-5961 für 0,075 x 105 mm) oder Quick Turn Fittings (5067-5966) für Säulen, die bei...
  • Page 31 DEUTSCH • Halten Sie die spezifischen Säulendruckgrenzwerte für jede Säule ein (siehe Diagramm). Eine Überschreitung dieser Werte beeinträchtigt die Chromatografieleistung und kann gefährlich werden. Weitere Hinweise: • Die Verwendung der Säule entgegen der Flußrichtung sollte vermieden werden, außer bei dem Versuch, verstopfte Fritten zu säubern (siehe “Säulenanwendungshinweise”) • Verwenden Sie für die Vorbereitung der mobilen Phase immer Reagenzien mit hoher Reinheit und Lösungsmittel in...
  • Page 32 Temperaturbereiche Phase empfohlener maximale pH-Bereich Betriebs-temperatur ZORBAX Eclipse Plus C18 pH 2.0 bis 9.0 60 °C und C8, Eclipse XDB-C8, XDB-C18, XDB-Phenyl, Poroshell 120 EC-C18 und EC-C8, ZORBAX Bonus-RP, HC-C18(2), TC-C18(2) Poroshell HPH pH 2.0 bis 11.0 60 °C ZORBAX Extend C18 pH 2.0 bis 11.5...
  • Page 33 2.7 µm, 4 µm 600 bar (Poroshell 120) (9000 psi) Poroshell 300 5 µm 400 bar (6000 psi) Alle ZORBAX-, Pursuit-, und 3.0 μm, 3.5 μm, 400 bar Polaris-Säulen ohne RRHT 5 μm (6000 psi) oder RRHD sowie HC-C18(2), TC-C18(2) mobile Phasen –...
  • Page 34 Bereich geeignet. *Die optimale Lebensdauer der Säule wird bei < 40 °C erreicht. Beim Arbeiten mit Poroshell 120, ZORBAX RRHT oder RRHD Säule mit 1.8 µm sollten immer UHPLC Vorsäulen verwendet werden, um Ihre analytische Säule zu schützen. Für weitere Informationen...
  • Page 35 Für Säulen, bei denen Rückspülungen durchgeführt werden können (Poroshell 120-, ZORBAX-Säulen mit Partikeln > 1.8 μm sowie alle Pursuit- und Polaris-Säulen), sollte anfangs ein stärkeres (weniger polares) Lösungsmittel verwendet werden. 1. Trennen Sie die Säule vom Detektor und füllen Sie die Lösungsmittel in ein Becherglas 2.
  • Page 36 Für Säulen mit Partikeln < 1.8 μm sollten Sie keine Rückspülung durchführen, sondern die Säule austauschen. empfehlungen zur lagerung Langfristig sollten Säulen auf Silikabasis mit gebundenen Phasen in einem reinen organischen Lösungsmittel gelagert werden. Wurde die Säule zuvor mit einer mobilen Pufferphase verwendet, sollte der Puffer entfernt werden, indem die Säule mit 20 bis 30 Säulenvolumina eines 50:50-Gemischs aus Methanol oder Acetonitril und Wasser und danach mit 20 bis 30 Säulenvolumina reinem Lösungsmittel gespült wird.
  • Page 37 DEUTSCH Tipps für optimale Chromatografieergebnisse • Optimieren Sie Ihr Instrument, indem Sie die Längen der Kapillaren zwischen den Komponenten minimieren, um zusätzliches Säulenvolu- men und Bandenverbreiterung zu reduzieren. Verwenden Sie rote Kapillaren mit einem Innendurchmesser von 0.12 mm für Fast-LC-/ Hocheffizienzsäulen.

  • Page 38: Guida Introduttiva

    Questo manuale fornisce informazioni generali sulle colonne a fase inversa ZORBAX, Poroshell, Pursuit, e Polaris. Per informazioni più dettagliate su una fase specifica o su una serie di prodotti, consultare il sito: agilent.com/chem/columnchoices Guida introduttiva Insieme a tutte le colonne Agilent vengono forniti un certificato di controllo qualità...
  • Page 39 • Sulla colonna è indicata la direzione del flusso. • Le colonne da 1.8 μm (ZORBAX RRHT, ZORBAX RRHD) possono essere utilizzate solo nella direzione del flusso indicata. • Agilent raccomanda di utilizzare raccordi in polichetone (cod.

  • Page 40: Altri Consigli Per L'utilizzo

    • Rispettare i limiti di pressione operativa indicati per ciascuna colonna (v. schema). Superare tali limiti è pericoloso e si rischia di compromettere le prestazioni cromatografiche. Altri consigli per l’utilizzo • Il flusso inverso non è di per sé dannoso per la colonna, dovrebbe tuttavia essere evitato a meno che venga utilizzato per rimuovere un frit intasato (v.”Cura della colonna”).
  • Page 41 Parametri per il funzionamento della colonna: pH e temperatura Fase Parametro pH max temperatura consigliato operativa ZORBAX Eclipse Plus C18 da pH 2.0 a 9.0 60 °C e C8, Eclipse XDB-C8, XDB-C18, XDB-Phenyl, Poroshell 120 EC-C18 e EC-C8, ZORBAX Bonus-RP,...
  • Page 42 600 bar (Poroshell 120) (9000 psi) Poroshell 300 5 µm 400 bar (6000 psi) Tutte le colonne ZORBAX, 3.0 μm, 3.5 μm, 400 bar Pursuit, e Polaris non 5 μm (6000 psi) specificate come RRHT o RRHD e HC-C18(2), TC-C18(2) selezione della fase mobile e temperature operative La fase stazionaria legata è...
  • Page 43 *Durata massima della colonna a < 40 °C. Se utilizzi colonne Poroshell 120, ZORBAX RRHT o RRHD da 1.8 µm, prendi in considerazione le pre-colonne ‘Fast Guard UHPLC’ per proteggere le tue colonne analitiche. Consulta il sito...
  • Page 44 2 μm. I campioni contenenti particolati vanno ad ostruire il frit dell’iniettore della colonna. Si consiglia l’utilizzo delle precolonne e dei kit specifici ZORBAX e Fast Guard se si impiegano campioni di questo genere. Sono tuttavia consigliate con tutti i tipi di colonna.
  • Page 45 ITALIANO Consigli per lo stoccaggio Si consiglia di conservare le colonne in silice e a fase legata in un solvente organico puro se si intende non utilizzarle a lungo. Se la colonna è stata precedentemente utilizzata con una fase mobile con tampone, rimuovere innanzitutto il tampone spurgando la colonna con 20-30 volumi di una miscela 50:50 di metanolo o acetonitrile e acqua, e poi con 20-30 volumi di solvente puro.
  • Page 46 Consigli per risultati cromatografici eccellenti • Ottimizzare lo strumento riducendo al minimo la lunghezza dei tubi dei componenti in modo da diminuire il volume extra-colonna e la larghezza di banda. Utilizzare tubi rossi da 0.12 mm di id per colonne Fast LC/elevata efficienza.

  • Page 47: Procedimientos Iniciales

    ESPAÑOL Este folleto ofrece información general para todas las columnas de fase reversa Poroshell, Pursuit, y Polaris. Para obtener más información detallada sobre su fase o familia específica, consulte: agilent.com/chem/columnchoices Procedimientos iniciales Todas las columnas Agilent incluyen un informe de Control de Calidad del rendimiento incluyendo un cromatograma de prueba.
  • Page 48 • La dirección de flujo está marcada en la columna. • Las columnas de 1.8 μm (ZORBAX RRHT, ZORBAX RRHD) solo pueden utilizarse en la dirección de flujo marcado en la columna. • Agilent recomienda usar conectores de policetona (5042-8957) para columnas de hasta 600 bar y un conector de conexión rápida A-Line...
  • Page 49 ESPAÑOL • Tenga en cuenta los límites de presión de operación indicados para cada columna (ver tabla más adelante). Si se sobrepasan estos límites, el rendimiento cromatográfico se verá afectado y podría no ser seguro. otros consejos de operación • Aunque por lo general no es perjudicial para la columna, se debería evitar el flujo inverso, excepto para intentar desobstruir una frita obstruida (ver “mantenimiento de la columna”).
  • Page 50 Parámetros de operación de la columna: pH y temperatura Fase intervalo de pH Temperatura máxima recomendado de operación ZORBAX Eclipse Plus C18 pH 2.0 a 9.0 60 °C y C8, Eclipse XDB-C8, XDB-C18, XDB-Phenyl, Poroshell 120 EC-C18 y EC-C8, ZORBAX Bonus-RP,...
  • Page 51 – columnas de hasta 9,4 mm de di Tipo de columna Tamaño de límite de partículas presión ZORBAX de resolución rápida 3.5 µm 400 bares (6000 psi) ZORBAX de resolución rápida 1.8 µm 600 bares alto rendimiento (RRHT) (9000 psi) ZORBAX de resolución rápida...
  • Page 52 *La vida útil óptima de la columna se alcanza a < 40 °C. Si está usando columna Poroshell 120 ó columnas ZORBAX RRHT ó RRHD de 1.8 µm, considere usar una Fast Guard para UHPLC para proteger su columna analítica. Visite...
  • Page 53 Para columnas en las que puede revertirse el flujo (columnas Poroshell 120, y columnas ZORBAX con partículas >1.8 μm y todas las columnas Pursuit y Polaris), comience con un disolvente más fuerte (menos polar). 1. Desconecte la columna del detector y eche los disolventes de lavado en un vaso.

  • Page 54: Recomendaciones De Almacenamiento

    Para columnas con partículas < 1.8 μm, no invierta el de flujo de la columna, sustituya la columna. recomendaciones de almacenamiento El almacenamiento a largo plazo de las columnas de fase ligada basadas en sílice debe realizarse en un disolvente orgánico puro. Si la columna se ha utilizado previamente con una fase móvil con tampón, primero debe ex- traerse el búfer purgando la columna con 20 a 30 volúmenes de columna de una mezcla 50:50 de metanol o acetonitrilo y agua, seguido de 20 a...
  • Page 55 ESPAÑOL Consejos para obtener los mejores resultados cromatográficos • Optimice el instrumento minimizando las longitudes de los tubos entre los componentes, para reducir así el volumen extra de la columna y el ensanchamiento de la banda. Utilice tubos rojos de 0.12 mm de di para columnas de LC rápida/alta eficiencia.
  • Page 56 この冊子には、すべての ZORBAX、 Poroshell、Pursuit、Polaris 逆相カラムに関す る一般情報が記載されています。 お使いの相またはファミリの具体的な詳 細については、下記を参照してくださ い： agilent.com/chem/columnchoices 入門 Agilent のすべてのカラムには、 カラムパフォーマンスレポート （テストクロマトグラムを含む）が付属しています。 テストシ ステムは、システムのデッドボリュームを最小化するために標準 のシステムから変更されているため、現在お使いのシステムとは 異なる可能性があります。これは、カラムの評価を精密化するこ とで、製品の一貫性を向上させるためです。正しくコンフィグレ ーションされたLC システムは、QC パフォーマンスレポートのクロ マトグラムと同様の結果を生成します。 近年のLCカラムは堅牢性が高く、一般的なクロマトグラフィー条件 下で長期間使用できるように設計されています。お客様は、カラ ムを仕様の範囲内で使用することで、カラムのパフォーマンスを 最大にすることが可能です。分析メソッドを最終決定する前に、 カラム仕様を必ず確認してください。...
  • Page 57 日本語 カラムの使用 据付 • フローの方向はカラム上に記載されています。 • HPLC カラムは、カラムに記された方向のフローでのみ使用で きます。 • アジレントでは、60 MPa (600 bar) までの圧力で使用する カラムにはポリケトンフィッティング (5042-8957) の使 用を推奨します。また、UHPLC の圧力下で使用されるカ ラムには A-Line クイックコネクトアセンブリ (0.075 x 105 mm 用 5067-5961) またはクイックターンフィッティング (5067-5966) の使用を推奨します。お使いのフィッティン グに適したキャピラリー接続を使用してください。 詳しくはホームページをご覧ください。 www.agilent.com/chem/a-linefittings Polyketone fitting, A- Line Quick Connect Quick Turn fitting, p/n 5042-8957 assembly, p/n 5067-5961...
  • Page 58 • カラムを分解するとカラムの性能が低下します。 • 新品のカラムには、有機溶媒と水の混合物が入っています。お 使いのカラムの溶媒組成については、QC パフォーマンスレポ ートを参照してください。初めて使用するときには、沈殿を生 じるおそれがある移動相をカラムに通さないように注意してく ださい。 • Agilent 逆相カラムは、水および一般的な有機溶媒が使用でき ます。 • カラムを保護し、カラムの寿命を延ばすため、ガードカラムの 使用を推奨します。 • カラムを保管する際には、高 pH および高温の環境を避けてく ださい。 • このカラムは、必ず推奨されるカラム相 pH 範囲内で使用して ください（次ページを参照） 。推奨される pH 範囲および温度 範囲の外で使用した場合、寿命が短くなるおそれがあります。 Poroshell 120、ZORBAX RRHTまたは 1.8 um のRRHDカラムを使用して いる場合、分析カラムを保護するために、Fast Guard を使用することをご検討ください。詳細は、 agilent.com/chem/fastguardsを参照してください。...
  • Page 59 日本語 カラムの動作パラメータ ： pH および温度 推奨 pH 範囲 相 最高使用 温度 ZORBAX Eclipse Plus C18 60 °C pH 2.0 ～ 9.0 および C8、Eclipse XDB-C8 XDB-C18、XDB-Phenyl、 Poroshell 120 EC-C18 および EC-C8、 ZORBAX Bonus-RP, HC-C18(2), TC-C18(2) Poroshell HPH 60 °C pH 2.0 ～ 11.0 ZORBAX Extend C18 pH 2.0 ～...
  • Page 60 最大動作圧力－ 内径 9.4 mm 以下のカラム カラムタイプ 粒子径 圧力上限 ZORBAX Rapid Resolution 3.5 µm 400 bar (6000 psi) ZORBAX Rapid Resolution High 1.8 µm 600 bar Throughput (RRHT) (9000 psi) ZORBAX Rapid Resolution High 1.8 µm 1200 bar Definition (RRHD) (17000 psi) 600 bar Poroshell 120 、...
  • Page 61 日本語 移動相のグラジェントについて 固定相 使用上の注意 最初は 5% メタノールまたはアセトニトリ ほとんどの ル、最終溶媒は 100% メタノールまたはア 逆相カラム セトニトリル。 ZORBAX Eclipse PAH* 最初は 30% または 40% アセトニトリル、 最終溶媒は 100% アセトニトリル。分解能 を向上させるには、必要に応じてカラムを 15 ～ 20 °Cに冷却。 ZORBAX Bonus-RP 化合物の溶離が、従来の長鎖アルキル固定 相に比べて、より低濃度の有機溶媒で可能 な場合もある。 ペプチド、タンパク分析用カ ポリペプチド、タンパク質、DNA 断片など ラム (Poroshell 300、...
  • Page 62 カラムのメンテナンス サンプルに粒子状の物質が含まれる場合、カラムフリットが詰ま ることがあります。このようなサンプルの場合はガードカラムお よびハードウェアキット（必要な場合）の使用が推奨されます。 これは上記の場合に限らずすべてのカラム使用において推奨され ます。 ガードカラムの詳細については、agilent.com/chem/fastguards を参照してください。 カラムのクリーニング ／カラム寿命の向上 バックフラッシュ可能なカラムの場合、強い（極性の小さい）溶 媒を最初に使用します。 1. カラムを検出器から外し、ビーカーに洗浄溶媒を入れます。 2. バッファー塩を含まない移動相（水／有機溶媒）を最初に使用 します。カラム体積の 10 ～ 20 倍の量を通します。 3. 次に、100% の有機溶媒（メタノールまたはアセトニトリル）を 使用します。 4. 圧力が正常に戻ったかどうかを確認し、ます。 5. 4までの手順で圧力が正常に戻らない場合は、カラムを破棄して 新しいカラムを使用します。 粒子径 1.8 μm カラムの場合、カラムのバックフラッシュは行わ ず、カラムを交換してください。...
  • Page 63 日本語 保管に関する注意事項 シリカベースのカラムを長期間保管するには、純粋な有機溶媒を 入れておく必要があります。カラムをバッファー入りの移動相で 使用した場合は、バッファーを除去するためにカラムをパージす る必要があります。このためには、最初にカラム体積の 20 ～ 30 倍の量のメタノールまたはアセトニトリルと水の 50 ： 50 の混合液を 使用し、次にカラム体積の 20 ～ 30 倍の量の溶媒を使用します。 保管の前に、充填剤の乾燥を避けるため、フィッティングにプラ グをしっかりとはめ込む必要があります。機器を保護するため、 バッファーを含まない同じ移動相でカラムをパージして、機器と カラムから塩を除去することをお勧めします（たとえば、60 ： 40 の ACN／0.02 M リン酸塩バッファー入り移動相を除去するには、 60 ： 40 の ACN／H 0 を使用します） 。この方法では、同じ移動相に より再平衡化時間を短縮でき、塩による腐食も防ぐことができま す。...
  • Page 64 最適なのクロマトグラフィ結果を得るためのヒント • 機器を最適化するため、コンポーネントの間の配管をできるだ け短くして、余分なカラム体積を減らし、バンドの拡大を避け ます。高速高分離カラムには、内径 0.12 mm の赤い配管を使用 します。キャピラリオプションについては、 agilent.com/chem/lccapillaries を参照してください。 • 使用するカラムに合わせてデータサンプリングレートを最適化 します。高速高分離カラム (Poroshell 120、RRHT、RRHD) の場合 は、サンプリングレートを速くします。 • サンプルに応じて、サンプル濾過やその他の適切なサンプル前 処理を行います。詳細については、 agilent.com/chem/sampleprep を参照してください。 • LC 機器の性能を最大化するため、 Agilent 認定のランプを使用します。...

  • Page 65: Начало Работы

    РУССКИЙ В этом буклете приведены общие сведения обо всех колонках обращенной фазы ZORBAX, Pursuit и Polaris. Подробные сведения о применяемой фазе или семействе см. на веб-странице agilent.com/chem/columnchoices Начало работы Все колонки Agilent поставляются с сертификатом качества, содержащим тестовую хроматограмму. Тестовое оборудование, применяемое при кон- троле...
  • Page 66 Использование колонки Установка • Направление потока указано на колонке. • При работе с колонками на 1.8 мкм (ZORBAX RRHT и ZORBAX RRHD) направление потока должно совпадать с указанным на колонке. • Для колонок с давлением до 600 бар Agilent рекомендует использовать...
  • Page 67 пределами рекомендованных диапазонов pH и температуры может привести к сокращению срока службы. При использовании аналитических колонок Poroshell 120 или ZORBAX RRHT или RRHD с размером частиц 1.8 мкм рекомендуется для их защиты использовать предколонки Fast Guard для ВЭЖХ сверхвысокого давления (UHPLC). Дополнительные сведения:...
  • Page 68 Рабочие параметры колонок: значения pH и температуры Фаза Рекомендован- Максимальная рабочая ный диапазон температура ZORBAX Eclipse Plus C18 pH от 2.0 до 9.0 60 °C и C8, Eclipse XDB-C8, XDB-C18, XDB-Phenyl, Poroshell 120 EC-C18 и EC-C8, ZORBAX Bonus-RP, HC-C18(2) и TC-C18(2) Poroshell HPH pH от...
  • Page 69 РУССКИЙ Максимальное рабочее давление, колонки с внутренним диаметром до 9,4 мм Тип колонки Размер частиц Предельное давление ZORBAX Rapid Resolution 3.5 мкм 400 бар (6000 psi) ZORBAX Rapid Resolution 1.8 мкм 600 бар (9000 psi) High Throughput (RRHT) ZORBAX Rapid Resolution 1.8 мкм 1200 бар (17 000 psi) High Definition (RRHD) Poroshell 120, Poroshell 2.7 мкм, 4 мкм...
  • Page 70 Большинство колонок 5-процентный метанол или ацетонитрил сначала обращенной фазы и 100-процентный метанол или ацетонитрил как окончательный растворитель. ZORBAX Eclipse PAH* 30- или 40-процентный ацетонитрил сначала и 100-процентный ацетонитрил как окончательный растворитель. Для улучшения разрешения может потребоваться охлаждение колонки до температуры от 15 до 20 °C.
  • Page 71 В колонках с размером частиц не менее 2.7 мкм используются входные вкла дыши с порами 2 мкм. Пробы, содержащие микрочастицы, могут засорять входные пористые вкладыши. С такими пробами рекомендуется использовать колонки ZORBAX и Fast Guard, а также специальные наборы (при необходимости); все эти меры предосторожности рекомендуются в целом для всех колонок.
  • Page 72 Рекомендации по хранению Для долговременного хранения колонок с привитой фазой на основе сили кагеля следует использовать чистый органический растворитель. Если ранее колонка использовалась с буферной подвижной фазой, сначала следует удалить буфер промывкой смесью метанола или ацетонитрила с водой (50:50) с расходом 20-30 объемов...
  • Page 73 РУССКИЙ Советы для получения лучших результатов хроматографии • Оптимизация установки путем максимального сокращения длины соединительных трубок между частями оборудования, чтобы уменьшить дополнительный объем колонки и размывание пиков. Используйте соединительные трубки красной маркировки с внутренним диаметром 0.12 мм для колонок ВЭЖХ. Подробнее о различных капиллярных трубках: agilent.com/chem/lccapillaries.
  • Page 74 Este guia oferece informações gerais para todas as colunas de fase reversa ZORBAX, Poroshell, Pursuit e Polaris. Para obter informações mais detalhadas sobre uma fase ou família específica, acesse: agilent.com/chem/columnchoices introdução Cada coluna Agilent traz um relatório de controle de qualidade do desempenho da coluna, incluindo um cromatograma de teste.
  • Page 75 • A direção do fluxo é indicada na coluna. • As colunas de 1.8 µm (ZORBAX RRHT, ZORBAX RRHD) só podem ser operadas na direção do fluxo indicada na coluna. • Agilent recomenda a utilização de conexões de policetona (5042-8957) para colunas de até...
  • Page 76 (consulte a próxima página). Operar fora das faixas recomendadas de pH e temperatura provocará a redução da vida útil da coluna. Caso utilize colunas Poroshell 120, ZORBAX RRHT ou RRHD de 1.8 µm, considere o uso de uma Fast Guard para UHPLC para proteger a coluna analítica.

  • Page 77: Parâmetros Operacionais Da Coluna: Ph E Temperatura

    PORTUGUÊS Parâmetros operacionais da coluna: pH e temperatura Fase Faixa de pH máxima temperatura recomendada operacional ZORBAX Eclipse Plus C18 pH 2.0 a 9.0 60 °C e C8, Eclipse XDB-C8, XDB-C18, XDB-Phenyl, Poroshell 120 EC-C18 e EC-C8, ZORBAX Bonus-RP, HC-C18(2) e...
  • Page 78 2.7 µm, 4 µm 600 bar (Poroshell 120) (9.000 psi) Poroshell 300 5 µm 400 bar (6.000 psi) Todas as colunas ZORBAX, 3.0 µm, 3.5 µm 400 bar Pursuit e Polaris não indicadas 5 µm (6.000 psi) como RRHT ou RRHD e HC- C18(2), TC-C18(2) escolha de fase móvel e temperaturas operacionais...
  • Page 79 Inicialmente 5% de metanol ou acetonitrila fase reversa e 100% de metanol ou acetonitrila como solvente final. ZORBAX Eclipse PAH* 30% ou 40% de acetonitrila inicialmente até 100% de acetonitrila como solvente final. Pode ser necessário resfriar a coluna para 15 °C a 20 °C para obter uma melhor...
  • Page 80 2 µm. As amostras que contêm material particulado obstruirão o frit da entrada da coluna. Com essas amostras, recomenda-se utilizar as colunas ZORBAX e Fast Guard e os kits de hardware (conforme necessário), que também são recomendáveis para uso com todas as colunas.
  • Page 81 PORTUGUÊS recomendações de armazenamento O armazenamento por longos períodos de colunas à base de sílica ou com fase ligada deve ser realizado em um solvente orgânico puro. Se a coluna foi usada anteriormente com uma fase móvel tamponada, primeiro o tampão deve ser removido purgando a coluna com volumes de 20 a 30 colunas com uma mistura de metanol ou acetonitrila e água a 50:50, seguido de volumes de 20 a 30 colunas de solvente puro.
  • Page 82 dicas para obter os melhores resultados de cromatografia • Otimize o desempenho do instrumento minimizando os comprimentos da tubulação entre os componentes para reduzir o volume extracoluna e a ampliação da banda. Use a tubulação vermelha com 0.12 mm de diâmetro interno para colunas de LC rápidas/de alta eficiência. Obtenha mais informações sobre opções de capilar em agilent.com/chem/lccapillaries • Assegure-se de que a taxa de coleta de dados esteja otimizada para...

  • Page 83: Further Information

    Further information For help choosing the right column, request the LC Column Selection Guide or the BioHPLC Column Selection Guide agilent.com/chem/getguides The LC Column and Sample Prep Navigator is a web-based tool that can help you find the right column for your method, based on your input.
  • Page 84 Learn more at agilent.com/chem/sampleprep This information is subject to change without notice. © Agilent Technologies, Inc. 2014 Printed in Canada, October 6, 2014 820000-999...

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PoroshellPursuitPolaris

Table des Matières