Agilent Technologies ZORBAX Guide D'utilisation page 79

Gradientes iniciais recomendados
Fase estacionária
A maioria das colunas de
fase reversa
ZORBAX Eclipse PAH*
ZORBAX Bonus-RP
Colunas de molécula
grande (ex.: colunas
Poroshell 300, ZORBAX
300SB)
*A melhor vida útil da coluna é alcançada a temperaturas inferiores a 40 °C.
observações de uso
Inicialmente 5% de metanol ou acetonitrila
e 100% de metanol ou acetonitrila como
solvente final.
30% ou 40% de acetonitrila inicialmente até
100% de acetonitrila como solvente final.
Pode ser necessário resfriar a coluna para
15 °C a 20 °C para obter uma melhor
resolução.
Para a eluição do composto é necessário
um modificador da fase móvel orgânica com
concentração mais baixa em comparação com
as fases estacionárias tradicionais de cadeias
longas do grupo alquila.
As separações de polipeptídios, proteínas,
fragmentos de DNA, etc., costumam usar ácido
trifluoroacético ou fórmico como modificador
para controlar o pH e/ou como aditivo de
pareamento iônico para obter a retenção
e a seletividade desejadas. Os tampões
orgânicos, como TRIS, são úteis principalmente
para aplicações de pH intermediário.
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