Gradients de départ recommandés
Phase stationnaire
La plupart des colonnes à
phase inverse
ZORBAX Eclipse PAH*
ZORBAX Bonus-RP
Colonnes pour les
biomolécules (par ex., les
colonnes Poroshell 300,
ZORBAX 300SB)
*La plus longue durée de vie est obtenue à < 40 °C.
Si vous utilisez une colonne Poroshell 120, ou ZORBAX RRHT
ou RRHD 1.8 µm, pensez à la protéger grâce à une colonne
de garde Fast Guard pour UHPLC. Consultez le site
agilent.com/chem/fastguards pour plus d'informations.
remarques d'utilisation
D'abord 5% de méthanol ou d'acétonitrile puis
100% de méthanol ou d'acétonitrile comme
solvant final.
D'abord 30 ou 40% d'acétonitrile, jusqu'à
100% d'acétonitrile comme solvant final. Il peut
être nécessaire de refroidir la colonne à
15-20 °C pour obtenir une meilleure résolution.
Une proportion de solvant organique inférieure
est requise pour l'élution du composé, par
rapport aux phases stationnaires à longue
chaîne alkyle traditionnelles.
Les séparations de polypeptides, protéines,
fragments d'ACN, etc. exigent généralement
un modifiant tel que l'acide trifluoroacétique
ou l'acide formique pour contrôler le pH
et/ou comme additif de paires d'ions pour
obtenir la rétention et la sélectivité désirées.
Les tampons organiques tels que les TRIS sont
spécialement utilisés pour les applications de
pH intermédiaires.
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