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Guide du système de séquençage NovaSeq 6000
5
Pipettez et distribuez lentement pour éviter la formation de bulles et assurez-vous que le volume entier
est expulsé de la pointe.
6
Agitez pendant 20 à 30 secondes ou jusqu'au mélange complet.
REMARQUE
Le mélange principal ExAmp est stable à mélanger.
Le mélange peut paraître trouble, c'est normal.
7
Centrifugez jusqu'à 280 x g durant une minute.
8
Pour une performance de séquençage optimale, passez immédiatement à l'étape suivante. Si
nécessaire, conservez le mélange principal en le plaçant pendant un maximum d'une heure sur de la
glace. Utilisez le mélange dans les 30 minutes suivantes si conservé à température ambiante.
Charger des librairies sur la Flow Cell
Pour de meilleurs résultats, procédez comme suit :
Gardez la Flow Cell chargée à température ambiante. Ne la mettez pas au réfrigérateur ni sur de la glace.
u
Une incubation prolongée peut réduire le pourcentage d'amplifiats passant le filtre (%PF).
u
Démarrez l'analyse dans les 30 minutes suivant le chargement des groupements de librairies sur la
u
Flow Cell.
L'utilisation immédiate du mélange ExAmp/librairie donne de meilleurs résultats.
u
1
Ajoutez le mélange principal ExAmp à chaque groupement de librairies dénaturé comme suit, puis agitez
pendant 20 à 30 secondes pour mélanger.
Si vous utilisez des barrettes de tubes, pipettez pour mélanger jusqu'à obtention d'une consistance
homogène.
Mode
Regroupement de librairies dénaturées (µl)
SP/S1
S2
S4
2
Centrifugez jusqu'à 280 x g durant une minute.
3
À l'aide d'une pipette p200 µl, ajoutez le volume approprié du mélange ExAmp/librairie à chaque puis de
collecteur NovaSeq Xp.
Chargez les échantillons lentement pour éviter la création de bulles.
u
Assurez-vous d'ajouter le mélange du groupement de librairies au puits qui correspond à la ligne
u
prévue.
Évitez de toucher le filtre au font du puits pendant le pipetage.
u
Il n'est pas nécessaire d'attendre qu'une ligne se remplisse entièrement avant d'ajouter du mélange
u
aux autres puits du collecteur.
Mode
SP/S1
S2
S4
Les puits du collecteur NovaSeq Xp numérotés correspondent au numéro de la ligne de Flow Cell.
Lorsque la Flow Cell est inversée, la numérotation de la ligne est inversée.
Document nº 1000000019358 v14 FRA Support nº 20023471
Destiné à la recherche uniquement.
Ne pas utiliser dans le cadre d'examens diagnostiques.
27
33
45
Mélange ExAmp/librairie par puits (µl)
Mélange principal ExAmp (µl)
63
77
105
80
95
130
Volume obtenu (µl)
90
110
150
41
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