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Guide du système HiSeq 2000
2
Une fois les deux tubes de LFN décongelés, ajoutez leur contenu au flacon contenant 47 ml d'ICB.
3
Rincez chaque tube de LFN avec de l'ICB pour vous assurer que tout le LFN est transféré.
4
Ajoutez 1,1 ml d'EDP à la solution d'ICB et de LFN.
5
Replacez l'EDP inutilisé dans son lieu de stockage, entre -25 °C et -15 °C.
6
Mettez le bouchon sur le flacon contenant l'EDP, l'ICB et le FLN et renversez le flacon pour mélanger.
7
Réservez sur de la glace.
Préparer l'ICB pour la lecture 2 (index double)
Suiviez les directives ci-dessous pour calculer et préparer le volume d'ICB nécessaire pour la lecture 2 d'une
analyse à index double.
1
Mesurez les volumes suivants d'EDP, d'ICB et de LFN pour chaque tranche de 10 cycles de séquençage
devant être effectuée à la lecture 2.
Réactif
Volume pour 10 cycles
ICB
4,57 ml
LFN
0,6 ml
EDP
0,11 ml
Pour obtenir plus de renseignements sur le calcul des volumes, consultez la section
page 34.
2
Transférez le volume d'ICB mesuré dans un flacon de 250 ml.
3
Ajoutez le volume de LFN mesuré dans le nouveau flacon d'ICB.
4
Rincez chaque tube de LFN avec de l'ICB pour vous assurer que tout le LFN est transféré.
5
Ajoutez le volume d'EDP mesuré à la solution d'ICB et de LFN.
6
Rincez le tube d'EDP avec la solution d'ICB et de LFN pour vous assurer que tout l'EDP est transféré.
7
Mettez le bouchon sur le flacon contenant l'EDP, l'ICB et le FLN et renversez le flacon pour mélanger.
8
Réservez sur de la glace.
Charger les réactifs appariés
1
Assurez-vous que le support à paires de bases appariées n'est pas utilisé pour la resynthèse pour la
lecture 2, la préparation de la lecture d'index 1 (i7) ou la préparation de la lecture d'index 2 (i5) dans la
Flow Cell opposée.
2
Relevez les dispositifs d'aspiration du support de réactifs appariés, comme suit :
a
Tirez la poignée vers vous, puis soulevez-la.
b Relâchez la poignée dans la fente située en haut de la ligne. Veillez à ce que la poignée soit bien fixée
dans la fente.
3
Faites glisser le support de réactifs hors du compartiment de réactifs à l'aide de la poignée du support.
4
Débouchez tous les tubes des réactifs.
5
Placez chaque tube sur le support dans les positions numérotées correspondantes.
Document nº 15011190 v02 FRA
Destiné à la recherche uniquement. Ne pas utiliser dans le cadre d'examens diagnostiques.
Stockage
2 à 8 °C
-25 à -15 °C
-25 à -15 °C
Exemple de calcul,
48
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