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illumina HiSeq 2000 Guide page 21

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Guide du système HiSeq 2000
Préparer les réactifs SBS
Les réactifs SBS sont chargés dans l'instrument au début de l'analyse. Pour la préparation des réactifs,
suivez les directives ci-dessous afin de décongeler les réactifs SBS.
Décongeler les réactifs SBS
1
Retirez le CRM, l'IRM et l'USM de leur lieu de stockage entre -25 °C et -15 °C. Protégez l'IRM de la
lumière.
2
Décongelez-les à une température comprise entre 2 °C et 8 °C pendant 16 heures environ.
Vous pouvez aussi décongeler l'IRM et l'USM dans un bain d'eau désionisée à température ambiante
pendant environ 90 minutes. Décongelez le CRM dans un bain d'eau distinct.
REMARQUE
Changez toujours de gants après avoir manipulé le CRM.
3
Retournez chaque flacon pour en mélanger le contenu.
4
Réservez l'IRM et l'USM sur de la glace. Réservez le CRM séparément sur de la glace afin d'éviter la
contamination croisée.
5
Utilisez le PW1, le SB1, le SB2 et le SB3 sortant directement de leur lieu de stockage.
Préparer les réactifs d'indexage
Les réactifs d'indexage sont utilisés durant les lectures d'indexage d'une analyse de séquençage indexée.
Les trousses d'amplifiats appariés et à lecture unique comprennent le HP14, qui est utilisé pour la lecture 1
de l'index 1 (i7), sans égard au type de Flow Cell. Seule la trousse d'amplifiats à lecture unique comprend le
HP9, qui est nécessaire pour une analyse à index double sur une Flow Cell à lecture unique.
Type d'analyse
Lecture appariée à index simple
Lecture unique à index simple
Lecture appariée à index double*
Lecture unique à index double
* Les analyses appariées à index double utilisent le FRM, un réactif apparié, pour l'index 2.
Décongeler les réactifs d'indexage
1
Retirez les réactifs suivants de leur lieu de stockage entre -25 °C et -15 °C :
Pour toutes les analyses indexées sur une Flow Cell appariée : FDR et HP14
u
Pour toutes les analyses à index simple sur une Flow Cell à lecture unique : FDR et HP14
u
Pour toutes les analyses à index double sur une Flow Cell à lecture unique : FDR, HP9 et HP14
u
2
Décongelez les réactifs dans un bain d'eau désionisée à température ambiante pendant environ
20 minutes.
Document nº 15011190 v02 FRA
Destiné à la recherche uniquement. Ne pas utiliser dans le cadre d'examens diagnostiques.
Type de Flow Cell
Appariée
Lecture unique
Appariée
Lecture unique
Index 1 (i7)
Index 2 (i5)
HP14
--
HP14
--
HP14
--
HP14
HP9
14

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