5.7.2.3 Tracé
L'écran Série X > Tracé permet de visualiser les graphiques des séries contenant les étapes PCR ou
Dissociation. Pour les protocoles maison, les graphiques en temps réel des séries en cours peuvent
être visualisés, tout comme les séries terminées. Pour les tests IVD, les graphiques des séries
terminées peuvent être visualisés. L'écran Tracé permet de sélectionner tout un éventail de critères de
visualisation des graphiques, notamment l'affichage de tous les échantillons sur un seul graphique,
l'affichage des échantillons sous forme de graphiques miniatures individuels, l'affichage des seuls
résultats positifs (graphiques de PCR uniquement) et les options de visualisation des différentes
courbes en fonction des critères de filtrage.
Si une série en cours est ouverte à partir de l'écran de la liste des résultats, l'onglet Tracé affiche les
mesures en temps réel transmises par les lecteurs. Pour plus d'informations sur les graphiques en
temps réel, voir la section Graphiques des longueurs d'onde ci-dessous.
Graphiques de PCR
L'écran Tracé permet de visualiser les graphiques de PCR pour les échantillons lus par les
lecteurs de l'instrument BD MAX™. Les mesures sont représentées dans des graphiques linéaires
pour chaque longueur d'onde, sur la partie droite de l'écran. Une liste de positions d'échantillons,
affichée dans la partie gauche de l'écran, propose les positions d'échantillons à visualiser. Chaque
échantillon est représenté graphiquement dans une couleur unique permettant de différencier les
échantillons les uns des autres. Par défaut, les longueurs d'ondes non utilisées dans un test
donné ne sont pas affichées. L'utilisateur peut également recalculer la positivité des courbes pour
le protocole maison en ajustant le seuil.
Voir la figure 5-37 pour obtenir un exemple d'écran de graphique de PCR.
Graphiques de dissociation
L'écran Tracé permet également de visualiser les courbes des échantillons ayant subi une
dissociation afin de déterminer le point auquel l'ADN à double brin se dissocie. Un test
Dissociation ou une étape de dissociation dans un test doit être défini pour que les données soient
acquises. À la fin d'une PCR, le système effectue une analyse de la dissociation en chauffant
l'amplicon à double brin au taux de dissociation indiqué dans le test. Au fil de l'élévation de la
température, le système optique capture la lumière émise par les hybrides de la sonde cible sur
cette plage. L'intensité de la fluorescence et la pente moyenne de déclin de la fluorescence sont
déterminées. Le premier dérivé de la fluorescence par rapport à la température est mesuré. La
pente moyenne calculée est égale au seuil. Si les données du premier dérivé sont supérieures au
seuil, elles sont alors cumulées comme maximum possible. Les maxima possibles sont ensuite
triés par ordre décroissant en fonction de la hauteur.
Figure 5-35 – Exemple de rapport de quantification
5 – Références
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