Leica BIOSYSTEMS BOND CD43 Mode D'emploi page 16

• Angående avfallshantering av potentiellt toxiska material hänvisar vi till gällande europeiska, nationella och lokala bestämmelser
och förordningar.
• Minimera mikrobiologisk kontamination av reagens, annars kan en ökad icke-specifik infärgning bli resultatet.
• Om andra tider eller temperaturer används för inkubation vid retrieval kan resultaten bli otillförlitliga. Varje sådan förändring måste
valideras av användaren.
Bruksanvisning
CD43 primär antikropp har utvecklats för användning på det automatiserade systemet BOND i kombination med BOND Polymer Refine
Detection. Rekommenderat färgningsprotokoll för CD43 (MT1) primär antikropp är IHC Protocol F. Värmeinducerat epitop-retrieval
rekommenderas med användande av BOND Epitope Retrieval Solution 2 i 20 minuter.
Förväntade resultat
Normala vävnader
Klon MT1 detekterade CD43 antigen på membran och i cytoplasma hos T-celler och celler av myeloidursprung. Färgning observerades
inte i icke-hemopoietiska vävnadselement. (n=85).
Tumörvävnader
Klon MT1 färgade 21/43 lymfom, inklusive 5/14 diffusa stora B-cellslymfom, 1/6 follikelcenterlymfom, 0/5 Hodkins sjukdom, 2/2
mantelcellslymfom, 1/3 , 6/6 perifera T-cellslymfom, 1/2 anaplastiska storcelliga lymfom, 1/1 Burkittslymfom, 1/1 T-lymfoblastiskt lymfom,
1/1 angioimmunoblastiskt T-cellslymfom, 1/1 NK/T-cellslymfom och 1/1 T-cellrikt B-cellslymfom. Icke-lymfoida tumörer (n=41) var
negativa, utom för infiltrerande T-celler.
CD43 (MT1) rekommenderas för användning som del av en panel av antikroppar för immunofenotypning av T- och
B-cellslymfom och identifiering av myeloida defekter.
Produktspecifika begränsningar
CD43 (MT1) har optimerats vid Leica Biosystems för användning med BOND Polymer Refine Detection och BOND hjälpreagenser.
Användare som inte följer rekommenderade testprotokoll måste ta på sig ansvaret för att korrekt tolka patientresultat under dessa
förhållanden. Som följd av variationer i vävnadsfixering och effektivitet hos antigensförstärkningen kan protokollets tider variera och de
måste fastställas empiriskt. Negativa reagenskontroller bör användas när man optimerar betingelser för retrieval och protokolltider.
Felsökning
Se referens 3 för förslag till åtgärder.
Kontakta en lokal distributör eller Leica Biosystems regionkontor för att rapportera onormal infärgning.
Mer information
Mer information om immunfärgning med BOND-reagens finns under rubrikerna Bakgrund till metoden, Nödvändig materiel, Förbereda
provet, Kvalitetskontroll, Verifiering av assayer, Tolka infärgningsresultat, Symbolförklaring för etiketter och Allmänna begränsningar i
"Använda BOND-reagens" i BOND användardokumentation.
Bibliografi
1. Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.
2. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.
3. Bancroft JD och Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.
4. Attygalle AD, Liu H, Shirali S, et al. Atypical marginal zone hyperplasia of mucosa-associated lymphoid tissue: a reactive condition of
childhood showing immunoglobulin lambda light-chain restriction. Blood. 2004; 104(10):3343-3348.
5. Itoh T, Shimizu M, Kitami K, et al. Primary extranodal marginal zone B-cell lymphoma of the mucosa-associated lymphoid tissue type
in the CNS. Neuropathology. 2001; 21:174-180.
6. Bulmer JN, Jones RK och Searle RF. Intraepithelial leukocytes in endometriosis and adenomyosis: comparison of eutopic and ectopic
endometrium with normal endometrium. Human Reproduction. 1998; 13(10):2910-2915.
ProClin™ 950 är ett varumärke hos Supelco som ingår i Sigma-Aldrich Corporation.
Utgivningsdatum
26 oktober 2018
PA0938 Page 15