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•
La diffusion par réfraction-réflexion touche les particules pour lesquelles
D
> 1,0. La lumière diffusée est proportionnelle à D
--- -
λ
est proportionnel à c
•
Au cours de l'élution dans la colonne d'un pic chromatographique, la
concentration de l'analyte correspondant change. Elle passe de presque
nulle sur la ligne de base à un maximum qui dépend de l'efficacité de la
colonne, du volume d'injection, du temps de rétention et de la concentra-
tion de l'échantillon à l'injection. De son niveau maximal, la concentra-
tion revient ensuite à une valeur proche de zéro. Si la concentration est
suffisamment élevée, le diamètre de la particule sèche d'un soluté peut
varier selon les trois régimes précédemment décrits, Rayleigh, Mie et
réfraction-réflexion. Ce phénomène explique que les courbes d'étalon-
nage en détection ELS ne peuvent être linéaires sur plus d'un ordre de
grandeur.
Limites de la détection ELS
Notez les limites suivantes lors de la mise en œuvre de méthodes de
séparation et détection ELS globales :
•
La détection ELS est non linéaire pour de larges plages de concentra-
tions. Lors d'analyses avec le détecteur pour des analyses, il peut s'avé-
rer nécessaire d'essayer divers « Meilleurs ajustements », obtenus en
utilisant les réponses de type linéaire, quadratique ou log-log pour les
composés considérés. Il peut être également nécessaire d'établir des
regroupements pour les plages de concentrations attendues.
•
La détection ELS est une méthode d'échantillonnage destructive car
l'analyte est sacrifié pour générer les particules de diffusion. Le détec-
teur ELS doit donc, dans l'idéal, constituer le dernier détecteur d'une
série. Vous pouvez également placer le détecteur ELS en amont des
autres détecteurs ; dans ce cas l'effluent de la colonne doit être divisé
pour distribuer au détecteur ELS son propre flux en provenance du
système LC.
•
Toute particule peut interférer avec le signal de l'échantillon, y compris
celles des solvants chromatographiques de faible qualité, car le détec-
teur répond pareillement à toutes les particules. Ce manque de sélecti-
vité peut être à l'origine d'un bruit de fond problématique.
1-6
Principes optiques du détecteur ELS 2424
2/3
.
2
et le signal diffusé
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