Principes De Fonctionnement De La Cellule De Détection Avec Guide-Lumière - Waters ACQUITY PREMIER Manuel D'utilisation Et De Maintenance

1.1.2 Principes de fonctionnement de la cellule de détection avec
guide-lumière
Les colonnes de petit calibre et de capacité élevée, comme celles utilisées en UPLC, produisent
des pics de volume faible. Pour éviter l'étalement des pics et maintenir la concentration, le
volume de la cellule de détection doit être proportionnellement réduit. Waters propose de
maintenir le volume de la cellule à un maximum de 1/10
réduction de volume requise au moyen des cellules de détection traditionnelles du détecteur
d'absorbance, la longueur de la trajectoire doit être réduite afin d'éviter une chute brutale du débit
lumineux. La réduction de la longueur de trajectoire diminue la sensibilité analytique,
conformément à la loi de Beer. Des intensités lumineuses importantes sont toutefois nécessaires
pour préserver un rapport signal/bruit élevé.
Heureusement, une cellule de détection avec guide-lumière de petit volume peut être conçue
pour intégrer une longueur de trajectoire optimale et un débit lumineux élevé. Une telle cellule de
détection est similaire à une fibre optique dans laquelle le noyau est le fluide de l'échantillon et la
gaine est en Teflon AF, un fluoropolymère particulier, amorphe, inerte chimiquement, produit par
DuPont. L'indice de réfraction du Teflon AF est inférieur à celui de l'eau ou de toute autre phase
mobile de HPLC. Les rayons lumineux qui pénètrent le noyau liquide selon le demi-angle de cône
α sont totalement réfléchis à l'intérieur par la frontière en Teflon AF. Ces rayons sont transmis via
la cellule de détection, en théorie sans subir de perte, à l'exception de l'absorption par
l'échantillon.
Figure 1–2 : Transmission de la lumière via une cellule de détection avec guide-lumière
Ces précisions viennent compléter l'illustration précédente :
• Le noyau du guide de lumière correspond à l'échantillon de fluide dont l'indice de réfraction
est n .
1
• La gaine est un tube en Teflon AF dont l'indice de réfraction est n
• La surface transversale du tube est A et sa longueur est d. Le volume de la cellule est égal à
Ad.
La figure illustre deux rayons lumineux réfléchis par l'interface gainant le noyau. Dans une cellule
de détection, le nombre de rebonds dépend de la longueur du tube en Teflon AF, de son diamètre
interne (lumen), et de l'angle du rayon, également appelé α. Le faisceau lumineux, qui représente
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du volume de pic. Pour obtenir la
et est inférieur à n
2
.
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