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Biometra TRIO
User:
Admin
Polymerase Template:
PCR Method:
Product length:
Primer Annealing Temp.:
Ta = Tm - 5°C
Amplification Cycles:
Increment:
Home
Fig. 19
Page des paramètres de l'assistant de protocole
} Sélectionner un programme à deux étapes ou trois étapes en cochant la case corres-
pondante. Dans un programme à deux étapes, l'annelage et l'élongation sont regrou-
pés dans une même étape.
} Saisir la longueur du produit PCR en paires de bases (pb). Le logiciel calcule le temps
de maintien pour l'étape d'élongation à l'aide de la longueur du produit.
} Si connue : saisir la température d'annelage en °C.
En général : T
= T
– 5 °C
a
m
} Si la température d'annelage n'est pas connue : avec Calc Ta, ouvrir la page Edit Pri-
mer afin de calculer la température d'annelage en s'appuyant sur la séquence nucléo-
tidique de l'amorce sens et de l'amorce antisens.
} Saisir le nombre de cycles souhaités.
} Pour la programmation d'une étape d'optimisation de la température (EOT) permet-
tant de vérifier la température d'annelage théorique et de l'optimiser ensuite :
– Appuyer sur le bouton TOS.
ü Un nouveau champ de saisie Increment: s'ouvre.
} Saisir un incrément de température.
} Une fois que tous les paramètres du programme ont été définis, ouvrir la page View
parameter avec Next. La page affiche les paramètres déterminés du programme.
Initial Denaturation
Denaturation
30x
Annealing
Elongation
Final Elongation
Final Storage
Protocol Wizard
InnuDry
Two step
Three step
TOS
Temperatur
e [°C]
95.0
95.0
55.0
72.0
72.0
16.0
Utilisation
dd.mm.yyyy hh:mm
Back
Next
Hold Time
(h:mm:ss)
0:02:00
0:00:02
0:00:02
0:00:06
0:01:00
∞
47
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