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Structure et fonction
3.2.2
Étape d'optimisation de la température (EOT)
3.2.3
Couvercle chauffant
16
Fig. 2
Trois thermoblocs
Les trois thermoblocs sont conçus en aluminium et revêtus d'un alliage spécial. Les blocs
en aluminium offrent des vitesses de chauffage et de refroidissement élevées pour des
temps d'exécution des protocoles rapides.
Dès que le couvercle est fermé, un joint en caoutchouc sur le couvercle chauffant forme
un espace encapsulé autour du bloc d'échantillonnage. L' e space fermé améliore l' u nifor-
mité de la température du bloc d' é chantillonnage et évite la formation d' e au de conden-
sation lors de la dernière étape de refroidissement de la PCR. De plus, tous les blocs
d'échantillonnage sont parfaitement scellés pour empêcher la condensation de pénétrer
dans les éléments Peltier sous le bloc d' é chantillons et dans les autres parties de l' é lec-
tronique. Le joint protège les éléments Peltier et prolonge la durée de vie de l' a ppareil.
La température d'annelage exerce une grande influence sur la réaction PCR :
si vous sélectionnez une température d'annelage trop faible, les amorces pourraient
¡
se fixer sur des séquences nucléotidiques qui ne sont pas entièrement complémen-
taires. La réaction se déroule alors de manière moins spécifique. Des sous-produits
indésirables se forment.
¡
Si vous sélectionnez une température d'annelage trop élevée, le déplacement ther-
mique des amorces est si important dans certaines circonstances qu'elles ne se
fixent pas correctement. On observe alors une formation de produit inexistante ou
insuffisante.
La température d'annelage optimale se situe entre 5 et 10 °C sous la température de fu-
sion moyenne des amorces. Cela correspond à une température de 55 ... 65 °C.
La fonction Temperature Optimisation Step (TOS) vous permet d'optimiser le pro-
gramme de température pour de nouvelles paires d'amorce au cours d'un cycle unique.
Pendant l'étape d'annelage, la fonction Temperature Optimisation Step (TOS) chauffe
les trois blocs d'échantillonnage à trois températures différentes. Pour ce faire, définis-
sez uniquement la température pour le bloc d'échantillonnage 2 et la différence de tem-
pérature (incrément) par rapport aux blocs 1 et 3. La différence de température maxi-
male programmable entre les blocs d'échantillonnage s'élève à 47,5 °C.
Le couvercle chauffant chauffe deux fois plus vite que les anciens modèles, ce qui per-
met de réduire les temps d' e xécution des protocoles. De plus, le couvercle chauffant
remplit deux autres fonctions importantes :
Il évite la condensation de l'échantillon liquide sur les surfaces du bloc.
¡
Grâce à la pression de contact constante, le couvercle chauffant applique un contact
¡
fiable entre les cuves de réaction et le thermobloc.
Biometra TRIO
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