Publicité
Structure et fonction
3
Structure et fonction
3.1
Principe de fonctionnement
14
Développé en 1983 par Kary Mullis, la PCR (réaction à chaîne polymérase) est devenue
une technique utilisée fréquemment et indispensable dans les laboratoires de recherche
médicale et biologique.
Le thermocycleur à point final amplifie les acides nucléiques dans une réaction PCR par
des cycles répétés de chauffage et de refroidissement et en utilisant des ADN polymé-
rases.
Un programme PCR classique comporte les étapes suivantes :
N° de
Étape
l'étape
1
Dénaturation initiale
2
Dénaturation
3
Annelage
4
Élongation (ou exten-
sion)
5
Élongation finale
6
Stockage final
Le programme PCR représenté à titre d'exemple répète les étapes 2 à 4 de manière cy-
clique afin de doubler le segment d'ADN caractéristique lors de chaque cycle. La quantité
de produits augmente alors de façon exponentielle.
L'appareil combine la technologie la plus récente avec un design ergonomique et un lo-
giciel facile d'utilisation. L'interface utilisateur est composée d'un écran tactile. L'écran
affiche la durée, l'état et le programme de température dans une vue graphique et ta-
bleur pour chaque cycle. Vous pouvez saisir directement des informations et des para-
mètres de programme sur l'écran via le clavier de l'écran tactile.
L'appareil peut exécuter simultanément trois cycles PCR différents, raison pour laquelle il
est particulièrement adapté pour les applications pour lesquelles vous souhaitez incuber
différents échantillons avec différents programmes PCR.
Température
Explication
à titre
d'exemple
95 °C
Dénaturation initiale du brin
¡
d'ADN : séparation en deux brins
simples
Activation de l'enzyme polymé-
¡
rase
95 °C
Dénaturation : séparation des pro-
duits de la réaction PCR en deux
brins simples
55 °C
Hybridation des paires d'amorces,
composées d'une amorce sens et
d'une amorce antisens, qui déter-
minent le début et la fin du segment
d'ADN caractéristique
70 °C
Élongation du brin : Construction du
brin d'ADN complémentaire via l'en-
zyme polymérase et à l'aide de nu-
cléotides libres, en commençant sur
les amorces
70 °C
Extension finale du brin
10 °C
Stockage des échantillons amplifiés
jusqu'à la mesure ou au traitement
Biometra TRIO
Publicité
