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neutre tamponné à 10 %. Les tissus doivent ensuite être déshydratés dans de l'alcool, puis
éclaircis au xylène, et enfin imprégnés de paraffine liquide et maintenus à une température ne
dépassant pas 60 °C. L'épaisseur de coupe des échantillons tissulaires doit être comprise entre
3 et 5 μm.
Les lames requises pour l'évaluation de l'oncoprotéine HER2 et la vérification de la tumeur
doivent être préparées en même temps. Afin de préserver l'antigénicité, les coupes tissulaires
montées sur les lames (Leica Biosystems' Plus Slides, réf. S21.2113) doivent être colorées
dans un délai de 4 à 6 semaines après la coupe quand elles sont stockées à température
ambiante (18 à 24 °C). Après la coupe, il est recommandé de laisser les lames incuber pendant
12 à 18 heures (pendant la nuit) à 37 °C. Les coupes qui requièrent davantage d'adhérence
peuvent être incubées à 60 °C pendant une heure supplémentaire.
Aux États-Unis, le Clinical Laboratory Improvement Act (loi relative à l'amélioration des
laboratoires cliniques) de 1988 stipule dans l'article 42 CFR 493.1259(b) que « le laboratoire
est tenu de conserver les lames colorées pendant une durée minimale de dix ans à compter de
la date d'examen et de conserver les blocs d'échantillons pendant une durée minimale de deux
ans à compter de la date d'examen. »
Avertissements et précautions
Uniquement pour les utilisateurs professionnels.
Le produit renferme un ou plusieurs produits dangereux.
Les personnes âgées de moins de 18 ans ne sont pas autorisées à travailler avec ce produit. Les
utilisateurs doivent avoir reçu des instructions précises concernant la procédure, les propriétés
dangereuses et les prescriptions de sécurité nécessaires.
Les symptômes de surexposition au ProClin
peuvent inclure des irritations cutanées et oculaires ainsi qu'une irritation des membranes
muqueuses et des voies respiratoires supérieures. La concentration de ProClin
produit s'élève à 0,35 % au maximum. Ces solutions ne répondent pas aux critères de l'OSHA
(administration chargée de la santé et de la sécurité sur les lieux de travail) pour les substances
dangereuses. Une Material Safety Data Sheet est disponible sur demande ou sur le site Internet
www.LeicaBiosystems.com.
Les échantillons, avant et après la fixation, ainsi que tous les matériaux exposés à ces
échantillons, doivent être traités comme s'ils étaient susceptibles de transmettre une infection
et éliminés avec les précautions qui s'imposent.
Ne jamais pipetter les réactifs à la bouche et veiller à éviter tout contact des réactifs et des
échantillons avec la peau et les membranes muqueuses. Si les réactifs ou les échantillons
entrent en contact avec des zones sensibles, rincer abondamment à l'eau. Demander conseil
à un médecin. Il convient de se renseigner sur les réglementations locales ou nationales en
vigueur pour l'élimination de tout composant potentiellement toxique.
Minimiser la contamination microbienne des réactifs afin d'éviter une augmentation de coloration
non spécifique.
Procédure
A. Réactifs requis mais non fournis
•
BOND Dewax Solution (réf. AR9222)
•
BOND Epitope Retrieval Solution 1 (réf. AR9961)
•
BOND Wash Solution x10 Concentrate (réf. AR9590)
•
Solvants standard utilisés en immunohistochimie (par ex. éthanol, absolu ou classé)
•
Xylène (ou substitut de xylène)
•
Milieu de montage
•
Eau distillée ou eau déionisée
Leica Biosystems Bond Oracle HER2 IHC System Instructions for Use TA9145 ROW-FR-CE-Rev_B 24/01/2017
950, le préservateur utilisé dans les réactifs Oracle,
TM
950 dans ce
TM
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