l'exclusion stérique et la chromatographie en phase inverse), incluse sur le support de
documentation du système.
Pour une souplesse maximale lors du développement des méthodes, nous vous recommandons
d'installer dans votre système le gestionnaire de colonnes et les gestionnaires de colonnes
auxiliaires, ainsi que la vanne de sélection de solvant à six voies en option dans le QSM. La
technologie Auto•Blend Plus, en standard sur le système, automatisera la préparation de toutes
vos phases mobiles à pH donné à partir des solvants purs, pour un développement plus facile
des méthodes.
2.7 Préparation des échantillons
2.7.1 Particules
Waters recommande de filtrer tous les échantillons contenant des particules sur un filtre de
0,2 µm, ou d'installer un filtre pré-colonne. Du fait de sa petite taille, 0,2 µm, le fritté de la colonne
s'obstrue plus facilement que les frittés des colonnes HPLC de 2,0 µm. En analyse UPLC, il faut
donc utiliser des solvants de phase mobile et des solutions d'échantillon exempts de toute
particule.
2.7.2 Choix du diluant d'échantillon
Lorsque vous utilisez l'option de dilution automatique du module d'injection, le solvant de purge
sert également de diluant d'échantillon. Vérifiez que votre solution d'échantillon est soluble et
miscible dans le solvant de purge choisi.
2.8 Transfert de méthodes
Le transfert d'une méthode LC d'un système à un autre est parfois nécessaire. L'objectif dans ce
cas est de conserver au minimum la performance de séparation, ou de l'améliorer en réduisant la
durée d'analyse, en améliorant la résolution, ou les deux. Le système ACQUITY Premier
spécialement conçu par Waters pour faciliter le transfert de méthodes, est l'outil idéal pour
atteindre cet objectif grâce à la gestion de solvant quaternaire, au mélange basse pression et à la
technologie FTN (Flow Through Needle, débit via aiguille). Le gestionnaire de colonne en option
facilite la commutation entre colonnes cibles, tout en limitant l'étalement des pics et en
conservant un profil de température identique à celui obtenu avec un four à colonne standard.
L'exemple de transfert de méthode ci-dessous montre le test de substances apparentées pour la
galantamine, un alcaloïde utilisé dans le traitement de la maladie d'Alzheimer. La méthode USP
(monographie : USP32-NF27, supplément 2, page 4245) est tout d'abord démontrée en utilisant
un système HPLC. Cette méthode est ensuite transférée sur un système ACQUITY équipé d'une
colonne HPLC, ce qui permet de conserver la sélectivité et la résolution. Elle est ensuite adaptée
2 février 2022, 715006884FR Version 01
Page 47