120 %
100 %
80 %
60 %
40 %
20 %
0 %
-20 %
-40 %
La colonne « Amplification » indique l'efficacité de l'échantillon. Une réaction 100 % efficace
donnerait une valeur d'amplification de 2 pour chaque échantillon, autrement dit l'amplicon double
à chaque cycle. Dans les données brutes, le signal doit doubler en phase exponentielle. Par
exemple, si le signal était à 50 unités de fluorescence au cycle 12 et 51 unités de fluorescence au
cycle 13, il doit augmenter à 53 unités de fluorescence au cycle 14. La moyenne de toutes les
valeurs d'amplification pour chaque échantillon est établie afin d'obtenir la valeur d'amplification
indiquée à droite de l'écran sous les boutons. Plus la variation entre les valeurs d'amplification
estimées de chaque échantillon est importante, plus l'intervalle de confiance sera important (indiqué
par la valeur après le signe ±). L'intervalle de confiance, pour un numéro d'échantillon (N)
important, donne une probabilité de 68,3 % que la véritable amplification des échantillons soit
dans cette plage (1 écart-type). En doublant l'intervalle ±, vous obtenez un intervalle de confiance
de 95,4 % pour un N important.
Réplicats de calibrateur
Comme dans la méthode delta delta C
effectuées par rapport à cet échantillon. Les réplicats du calibrateur peuvent être analysés car, si
plusieurs positions d'échantillons portent le même nom, la moyenne des points de hausse de ces
échantillons est utilisée. Pour utiliser correctement cette fonctionnalité, veillez à ce que les réplicats
aient des noms identiques.
L'amplification moyenne permet de calculer l'expression. Par exemple, un échantillon
présentant une valeur d'amplification faible mettra plus de temps à atteindre un certain nombre
absolu de copies qu'un échantillon présentant une valeur d'amplification supérieure.
Manuel d'utilisation du Rotor Gene Q MDx CE 02/2022
Maximum de la dérivée seconde
Point de hausse
, un échantillon calibrateur est requis et les mesures sont
T
111