Analyse Des Données De Real-Time Pcr - Qiagen Rotor-Gene Q MDx CE Manuel D'utilisation

11. Modifiez les noms des échantillons (facultatif). Vous pouvez modifier les noms des échantillons
pendant ou après un cycle d'exécution.
10.8 Analyse des données de real-time PCR
Il est intéressant d'analyser les données de real-time PCR avant d'analyser les données de HRM.
Les données de real-time PCR peuvent mettre en évidence des dosages peu performants. En
identifiant ces valeurs aberrantes et en les écartant de l'analyse de HRM à venir, vous améliorez
nettement l'efficacité globale de l'analyse de HRM, car l'analyse d'un produit de PCR de qualité
médiocre donnera des résultats de HRM médiocres. Nous vous recommandons d'analyser les
données de real-time PCR quantitative comme suit.
1. Analysez les données en temps réel à l'aide de l'option Quantitation (Quantification) dans la fenêtre
Analysis (Analyse). Si l'une des valeurs de C
correspondantes ont amplifié trop tard. Vous devez analyser ces échantillons avec méfiance ou les
éliminer de l'analyse en tant que valeurs aberrantes. L'amplification tardive est souvent due à une
quantité de matrice de départ trop faible et/ou à des niveaux élevés de dégradation de l'échantillon.
2. Évaluez le niveau de fluorescence finale. Si la fluorescence finale sur l'un des tracés
d'amplification est faible comparée à la plupart des tracés de la série de données, éliminez ces
échantillons de l'analyse même si leur valeur de C
faible peut indiquer une quantité incorrecte de colorant, des taux incorrects de composants
réactionnels (comme les amorces) ou l'action d'inhibiteurs.
3. Utilisez l'option Comparative Quantitation (Quantification comparative) dans la fenêtre Analysis
(Analyse) pour obtenir l'efficacité de la réaction de chaque échantillon. Si l'efficacité n'est pas
similaire à d'autres réactions de l'expérience ou si elle est inférieure à 1,4 environ, éliminez la
réaction en tant que valeur aberrante.
Manuel d'utilisation du Rotor Gene Q MDx CE 02/2022
est d'au moins 30, on considère que les réactions
T
est inférieure à 30. Une fluorescence finale
T
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