Chapitre 5
Théorie du contraste spectral
Ce chapitre explique la théorie se cachant derrière la technique du contraste spectral qui
sert à comparer les spectres d'absorbance ultraviolet/visible collectés par le
détecteur 2996. Le contraste spectral part du principe que des composés différents ont des
spectres d'absorbance de forme différente. Ce chapitre décrit comment le contraste
spectral représente les spectres d'absorbance sous la forme de vecteurs. Lorsqu'il est
appliqué aux données d'absorbance ultraviolet/visible collectées par le détecteur 2996, le
contraste spectral permet de déterminer si les différences entre les spectres sont dues à la
présence de plusieurs composés dans les mêmes pics (coélution) ou si ces différences
peuvent être attribuées à des conditions indésirables comme le bruit, une erreur
photométrique ou les effets du solvant.
5.1 Comparaison des spectres d'absorbance
La forme d'un spectre d'absorbance est fonction de l'absorbance relative à différentes
longueurs d'onde. La forme des spectres d'absorbance d'un composé est une
caractéristique de ce composé, avec laquelle sont pris en compte le solvant et le pH,
auxquels le spectre d'absorbance est mesuré.
La
figure 5-1
entre l'absorbance à 245 nm et l'absorbance à 257 nm est d'approximativement 2,2 pour
le composé A et 0,7 pour le composé B.
Cependant, s'en tenir aux rapports d'absorbance de deux paires de longueurs d'onde
constitue une comparaison spectrale limitée. Pour avoir plus d'informations, comparez les
rapports d'absorbance de plusieurs longueurs d'onde.
représente les spectres d'absorbance des deux composés A et B. Le rapport
Comparaison des spectres d'absorbance
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