de détection et non deux, une pour la référence et l'autre pour l'échantillon, utilisées
simultanément. Le détecteur produit un spectre de fluorescence en effectuant l'un des balayages
suivants sur la cellule de détection :
• Balayage du blanc : caractérise le spectre d'absorbance de ligne de base d'un solvant.
• Balayage en excitation de l'échantillon : soustrait le balayage du blanc et affiche ou
représente uniquement les résultats correspondant aux spectres d'excitation de l'échantillon.
• Balayage en émission de l'échantillon : soustrait le balayage du blanc et affiche ou
représente uniquement les résultats correspondant aux spectres d'émission de l'échantillon.
Pour obtenir le spectre d'émission ou d'excitation d'un échantillon, effectuez un balayage du
blanc suivi du balayage de l'échantillon approprié. En général, vous effectuez un balayage du
blanc avec un solvant pur et un balayage de l'échantillon avec l'analyte dissous dans le même
solvant.
3.7.5 Mode de spectre lambda-lambda
En utilisant le mode spectre lambda-lambda, ou λ-λ, du détecteur, vous pouvez déterminer la
fluorescence maximale des analytes inconnus et les utiliser pour développer rapidement des
méthodes chromatographiques classiques intégrant les temps de rétention. Le mode Spectrum
λ-λ (Spectre λ-λ) crée un spectre caractérisant la fluorescence de l'analyte sur les axes
d'excitation/émission. Dans des conditions statiques d'écoulement, le détecteur balaye une plage
donnée de longueurs d'onde d'émission sur une plage donnée de longueurs d'onde d'excitation.
La fluorescence est ainsi tracée en fonction de l'excitation et de l'émission, et les résultats sont
enregistrés dans un fichier de données.
Les longueurs d'onde d'excitation sont indiquées sur l'axe habituellement utilisé pour le temps.
Les valeurs de longueur d'onde sont divisées par 10 pour tenir sur l'axe, qui continue d'afficher
des minutes.
Condition requise :
cuvette, proposé en option.
3.8 Performance énergétique de la lampe
Dans les détecteurs de fluorescence classiques, les performances en termes de rapport signal/
bruit sont directement proportionnelles à l'énergie fournie par la lampe à l'instrument. Les
facteurs ci-dessous peuvent influer sur l'énergie fournie par la lampe au détecteur :
• Ancienneté et rendement de la lampe
• Mauvaise maintenance du système optique et/ou de la cellule de détection
• Dégradation normale des composants optiques, notamment du tube photomultiplicateur
Les composants optiques se dégradent lentement au fil du temps. Dans les détecteurs de
fluorescence classiques, on augmente le gain du tube photomultiplicateur pour accroître la
Le mode Spectrum λ-λ (Spectre λ-λ) requiert l'utilisation du bloc de la
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