Řešení Problémů - Leica BOND MSH6 Mode D'emploi

Bezpečnostní opatření
• Tento produkt je určen pouze pro diagnostické použití in vitro.
• Koncentrace přípravku ProClin™ 950 je 0,35 %. Obsahuje aktivní složku 2-methyl-4-isothiazolin-3-on a může způsobit podráždění
kůže, očí, sliznic a horních cest dýchacích. Při manipulaci s reagenciemi používejte rukavice na jedno použití.
• Výtisk bezpečnostního listu materiálu získáte od místního distributora nebo oblastní kanceláře společnosti Leica Biosystems, nebo
můžete navštívit webové stránky Leica Biosystems: www.LeicaBiosystems.com.
• Se vzorky, před fixací i po fixaci, a se všemi materiály, které s nimi přišly do kontaktu, je nutno zacházet, jako by mohly přenášet
infekci, a zlikvidovat je s použitím příslušných bezpečnostních opatření2. Nikdy reagencie nepipetujte ústy a zabraňte kontaktu
reagencií a vzorků s kůží a sliznicemi. Pokud se reagencie nebo vzorky dostanou do kontaktu s citlivými oblastmi, omyjte je velkým
množstvím vody. Vyhledejte lékařskou pomoc.
• Údaje o likvidaci jakýchkoli potenciálně toxických komponent prostudujte ve federálních, státních nebo místních nařízeních.
• Minimalizujte mikrobiální kontaminaci reagencií, mohlo by dojít ke zvýšení výskytu nespecifického barvení.
• Získávání, inkubační doby nebo teploty jiné než specifikované mohou vést k chybným výsledkům. Jakákoliv změna musí být
validována uživatelem.
Návod k použití
Primární protilátka MSH6 (Mismatch Repair Protein) (EP49) byla vyvinuta k použití v automatickém systému BOND system (včetně
systému Leica BOND-MAX a Leica BOND-III) v kombinaci se soupravou BOND Polymer Refine Detection. Protokol doporučeného
barvení primární protilátky MSH6 (Mismatch Repair Protein) (EP49) je IHC Protocol F. Teplem indukované odmaskování epitopu se
doporučuje s použitím roztoku BOND Epitope Retrieval Solution 2 po dobu 20 minut.
Očekávané výsledky
Normální tkáně
Klon EP49 detekoval protein MSH6 v jádrech buněk různých tkání. Barvení bylo pozorováno v mozku, mozečku, adrenální žláze,
vaječníku, pankreatu, příštítné žláze, hypofýze, varlatech, štítné žláze, prsu, slezině, tonzile, thymu, plicích, jícnu, žaludku, tenkém
střevě, tlustém střevě, slinné žláze, ledvinách, prostatě, endometriu, děložním hrdle, kůži, periferních nervech, mezotelu, oku, hrtanu
a močovém měchýři. (Celkový počet normálních vyšetřovaných tkání = 112).
Nádorové tkáně
Klon EP49 barvil 117/122 kolorektálních karcinomů, 1/1 nádoru nadledvin, 2/2 nádorů močového měchýře, 4/4 nádorů prsu, 2/2 nádorů
kostí, 2/2 nádorů mozku, 2/2 nádorů jícnu, 3/3 nádorů žaludku, 9/9 nádorů intestinálního traktu, 1/1 nádoru ledvin, 3/3 nádorů jater, 3/3
nádorů plic, 2/2 nádorů lymfatických uzlin, 3/3 nádorů hlavy a krku, 1/1 nádoru jazyka, 3/3 ovariálních nádorů, 1/1 nádoru pankreatu, 2/2
nádorů prostaty, 1/1 nádoru kůže, 1/1 nádoru varlat, 4/4 nádorů štítné žlázy, 4/4 nádorů dělohy a 4/4 metastatických nádorů. (Celkový
počet vyšetřených abnormálních tkání = 180).
PA0990 se doporučuje k detekci proteinu MSH6 v normálních a neoplastických tkáních, jako doplněk ke konvenční
histopatologii s použitím neimunologických histochemických nátěrů.
Omezení specifická pro tento produkt
Materiál MSH6 (Mismatch Repair Protein) (EP49) byl společností Leica Biosystems optimalizován pro použití se soupravou BOND
Polymer Refine Detection a s pomocnými reagenciemi BOND. Uživatelé, kteří se při vyšetření odchýlí od doporučeného postupu, musí
za těchto okolností přijmout odpovědnost za interpretaci výsledků u pacienta. Doby uvedené v protokolu se mohou lišit v důsledku
odchylek při fixaci tkání a účinnosti při zvýraznění antigenu a musí být stanoveny empiricky. Při optimalizaci podmínek při získávání a
dob v protokolu musí být použity reagencie pro negativní kontrolu.
Řešení problémů
Nápravná opatření jsou uvedena v odkaze 3.
S hlášením neobvyklého barvení kontaktujte místního distributora nebo oblastní kancelář společnosti Leica Biosystems.
Další informace
Další informace o imunobarvení reagenciemi BOND naleznete pod názvy Princip metody, Potřebné materiály, Příprava vzorku, Kontrola
kvality, Ověření testů, Interpretace barvení, Vysvětlení symbolů na štítcích a Obecná omezení v uživatelské dokumentaci BOND, v bodě
„Použití reagencií BOND".
Bibliography
1. Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.
2. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.
3. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.
4. Offit K. MSH6 Mutations in Hereditary Nonpolyposis Colon Cancer: Another Slice of the Pie. Journal of Clinical Oncology. 2004;
22: 4449-4451.
5. Shia J, et al. Value of Immunohistochemical Detection of DNA Mismatch Repair Proteins in Predicting Germline Mutation in
Hereditary Colorectal Neoplasms. The American Journal of Surgical Pathology. 2005; 29: 96-104.
6. Shia J, et al. Immunohistochemistry as First-line Screening for Detecting Colorectal Cancer Patients at Risk for Hereditary
Nonpolyposis Colorectal Cancer Syndrome: A 2-antibody Panel May be as Predictive as a 4-antibody Panel. The American Journal
of Surgical Pathology. 2009; 33: 1639-1645.
7. Berends MJ, et al. Molecular and Clinical Characteristics of MSH6 Variants: An Analysis of 25 Index Carriers of a Germline Variant.
The American Journal of Human Genetics. 2002; 70: 26-37.
PA0990
Page 57