Leica BOND MSH6 Mode D'emploi page 61

Bezpečnostné opatrenia
• Tento produkt je určený na diagnostické použitie in vitro.
• Koncentrácia produktu ProClin™ 950 je 0,35 %. Obsahuje aktívnu zložku 2-metyl-4-izotiazolín-3-ón a môže spôsobiť podráždenie
kože, očí, slizníc a horných dýchacích ciest. Pri manipulácii s činidlami používajte jednorazové rukavice.
• Kartu bezpečnostný údajov materiálov vám poskytne miestny distribútor alebo regionálna pobočka spoločnosti Leica Biosystems,
prípadne navštívte webovú lokalitu spoločnosti Leica Biosystems www.LeicaBiosystems.com.
• So vzorkami pred fixáciou a po nej a všetkými materiálmi, ktoré s nimi prišli do kontaktu, je nutné manipulovať ako s potenciálne
infekčnými a zlikvidovať ich pri dodržaní zodpovedajúcich bezpečnostných opatrní
kontaktu činidiel a vzoriek s kožou a sliznicami. Ak sa činidlá alebo vzorky dostanú do kontaktu s citlivými oblasťami, umyte ich
veľkým množstvom vody. Vyhľadajte lekársku pomoc.
• Likvidáciu prípadných potenciálne toxických súčastí definujú federálne, štátne alebo miestne predpisy.
• Minimalizujte mikrobiálnu kontamináciu činidiel. V opačnom prípade môže dôjsť k zvýšeniu nešpecifického zafarbenia.
• Nedodržanie predpísaných dôb záchytu, inkubačných dôb alebo teplôt môže viesť k nesprávnym výsledkom. Akúkoľvek takúto
zmenu musí používateľ overiť.
Návod na použitie
Primárna protilátka MSH6 (Mismatch Repair Protein) (EP49) bola vytvorená na použitie v automatizovanom systéme BOND (zahŕňa
systémy Leica BOND-MAX a Leica BOND-III) v kombinácii so systémom BOND Polymer Refine Detection. Odporúčaný protokol
farbenia pre primárnu protilátku MSH6 (Mismatch Repair Protein) (EP49) je IHC Protocol F. Záchyt epitopov s tepelnou indukciou sa
odporúča použitím roztoku BOND Epitope Retrieval Solution 2 na 20 minút.
Očakávané výsledky
Normálne tkanivá
Klon EP49 detegoval proteín MSH6 v jadrách buniek rôznych tkanív. Zafarbenie bolo pozorované v mozgu, mozočku, nadobličkách,
vaječníkoch, pankrease, prištítnej žľaze, hypofýze, semenníkoch, štítnej žľaze, prsníku, slezine, tonzilách, týmuse, pľúcach, pažeráku,
žalúdku, tenkom čreve, hrubom čreve, slinnej žľaze, obličkách, prostate, endometriu, krčku maternice, koži, periférnych nervoch,
mezoteli, oku, hrtane a v močovom mechúre. (Celkový počet normálnych vyšetrených prípadov = 112).
Nádorové tkanivá
Klon EP49 zafarbil 117/122 kolorektálnych nádorov, 1/1 nádoru nadobličiek, 2/2 nádorov močového mechúra, 4/4 nádorov prsníka, 2/2
nádorov kostí, 2/2 nádorov mozgu, 2/2 nádorov pažeráka, 3/3 nádorov žalúdka, 9/9 nádorov tráviaceho traktu, 1/1 nádoru obličiek, 3/3
nádorov pečene, 3/3 nádorov pľúc, 2/2 nádorov lymfatických uzlín, 3/3 nádorov hlavy a krku, 1/1 nádoru jazyka, 3/3 nádorov vaječníkov,
1/1 nádoru pankreasu, 2/2 nádorov prostaty, 1/1 nádoru kože, 1/1 nádoru semenníkov, 4/4 nádorov štítnej žľazy, 4/4 nádorov maternice
a 4/4 metastatických nádorov. (Celkový počet abnormálnych vyšetrených prípadov = 180).
PA0990 sa odporúča na detekciu proteínu MSH6 v normálnych a neoplastických tkanivách ako doplnok konvenčnej
histopatológie pri použití neimunologických histochemických zafarbení.
Špecifické obmedzenia pre tento výrobok
MSH6 (Mismatch Repair Protein) (EP49) bol v spoločnosti Leica Biosystems optimalizovaný na použitie so systémom BOND Polymer
Refine Detection a pomocnými činidlami BOND. Používatelia, ktorí sa odchýlia od odporúčaných testovacích postupov, musia
akceptovať zodpovednosť za interpretáciu výsledkov pacienta za týchto okolností. Časy podľa protokolu sa môžu líšiť z dôvodu odchýlok
vo fixácii tkaniva a účinnosti zvýraznenia antigénu a musia sa zistiť empiricky. Pri optimalizácii podmienok záchytu a časov podľa
protokolov je potrebné použiť negatívne kontroly činidlom.
Riešenie problémov
Pri náprave môže byť nápomocná referencia 3.
Neobvyklé zafarbenie ohláste miestnemu distribútorovi alebo regionálnej pobočke spoločnosti Leica Biosystems.
Ďalšie informácie
Ďalšie informácie o imunofarbení s činidlami BOND nájdete v častiach Princíp postupu, Požadované materiály, Príprava vzorky, Kontrola
kvality, Overenie testu, Interpretácia zafarbenia, Legenda k symbolom na označení a Všeobecné limitácie v používateľskej dokumentácii
k systému BOND „Používanie činidiel BOND".
Bibliography
1. Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.
2. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.
3. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.
4. Offit K. MSH6 Mutations in Hereditary Nonpolyposis Colon Cancer: Another Slice of the Pie. Journal of Clinical Oncology. 2004;
22: 4449-4451.
5. Shia J, et al. Value of Immunohistochemical Detection of DNA Mismatch Repair Proteins in Predicting Germline Mutation in
Hereditary Colorectal Neoplasms. The American Journal of Surgical Pathology. 2005; 29: 96-104.
6. Shia J, et al. Immunohistochemistry as First-line Screening for Detecting Colorectal Cancer Patients at Risk for Hereditary
Nonpolyposis Colorectal Cancer Syndrome: A 2-antibody Panel May be as Predictive as a 4-antibody Panel. The American Journal
of Surgical Pathology. 2009; 33: 1639-1645.
7. Berends MJ, et al. Molecular and Clinical Characteristics of MSH6 Variants: An Analysis of 25 Index Carriers of a Germline Variant.
The American Journal of Human Genetics. 2002; 70: 26-37.
. Činidlá nikdy nepipetujte ústami a zabráňte
2
PA0990
Page 60