Précautions; Dépannage; Autres Informations - Leica BOND MSH6 Mode D'emploi

Précautions
• Ce produit est destiné à un usage de diagnostic in vitro.
• La concentration de ProClin™ 950 est de 0,35 %. Il contient l'ingrédient actif 2-méthyl-4-isothiazolin-3-one et peut provoquer une
irritation de la peau, des yeux, des membranes muqueuses et des voies respiratoires supérieures. Porter des gants jetables pour la
manipulation des réactifs.
• Pour obtenir un exemplaire de la Fiche de données de sécurité, contactez votre distributeur local ou le bureau régional de Leica
Biosystems. Vous pouvez également consulter le site Internet de Leica Biosystems, www.LeicaBiosystems.com
• Les échantillons, avant et après la fixation, ainsi que tous les matériaux exposés à ces échantillons, doivent être traités comme s'ils
étaient susceptibles de transmettre une infection et éliminés avec les précautions qui s'imposent
bouche et éviter le contact de la peau et des membranes muqueuses avec les réactifs ou les échantillons. Rincer avec de grandes
quantités d'eau en cas de contact des réactifs ou des spécimens avec des zones sensibles. Demander conseil à un médecin.
• Consulter les réglementations nationales, régionales ou locales relatives à l'élimination des composants potentiellement toxiques.
• Minimiser la contamination microbienne des réactifs sinon un accroissement du marquage non spécifique est susceptible de se
produire.
• La récupération ou des durées ou températures d'incubation autres que celles précisées peuvent donner des résultats erronés. Tout
changement de ce type doit être validé par l'utilisateur.
Mode d'emploi
L'anticorps primaire MSH6 (Mismatch Repair Protein) (EP49) a été développé pour être utilisé sur le système BOND automatisé (qui
comprend les systèmes Leica BOND-MAX et Leica BOND-III) en combinaison avec le système BOND Polymer Refine Detection.
Le protocole de coloration recommandé pour l'anticorps primaire MSH6 (Mismatch Repair Protein) (EP49) est IHC Protocol F. La
récupération d'épitopes induite par la chaleur est recommandée en utilisant la BOND Epitope Retrieval Solution 2 pendant 20 minutes.
Résultats attendus
Tissus normaux
Le clone EP49 a détecté la protéine MSH6 dans le noyau de cellules en provenance d'une variété de tissus. Un marquage a été observé
dans le cerveau, le cervelet, la glande surrénale, l'ovaire, le pancréas, la glande parathyroïde, l'hypophyse, le testicule, la thyroïde, le
sein, la rate, les amygdales, le thymus, le poumon, l'œsophage, l'estomac, l'intestin grêle, le côlon, les glandes salivaires, le rein, la
prostate, l'endomètre, le col de l'utérus, la peau, les nerfs périphériques, le mésothélium, l'œil, le larynx et la vessie. (Nombre total de
cas normaux évalués = 112).
Tissus tumoraux
Le clone EP49 a coloré 117/122 cancers colorectaux, 1/1 tumeur de la glande surrénale, 2/2 tumeurs de la vessie, 4/54 tumeurs du sein,
2/2 tumeurs des os, 2/2 tumeurs du cerveau, 2/2 tumeurs de l'œsophage, 3/3 tumeurs de l'estomac, 9/9 tumeurs du tractus intestinal,
1/1 tumeur du rein, 3/3 tumeurs du foie, 3/3 tumeurs du poumon, 2/2 tumeurs des ganglions lymphatiques, 3/3 tumeurs de la tête du du
cou, 1/1 tumeur de la langue, 3/3 tumeurs des ovaires, 1/1 tumeur du pancréas, 2/2 tumeurs de la prostate, 1/1 tumeur de la peau, 1/1
tumeur des testicules, 4/4 tumeurs de la thyroïde, 4/4 tumeurs de l'utérus et 4/4 tumeurs métastatiques. (Nombre total de cas anormaux
évalués = 180).
Le PA0990 est recommandé pour la détection de la protéine MSH6 dans les tissus normaux et néoplasiques, en complément à
l'histopathologie traditionnelle utilisant des marqueurs histochimiques non immunologiques.
Limites spécifiques au produit
Le MSH6 (Mismatch Repair Protein) (EP49) a été optimisé chez Leica Biosystems pour une utilisation avec le système BOND Polymer
Refine Detection et les réactifs auxiliaires BOND. Les utilisateurs qui s'écartent des procédures de test recommandées doivent accepter
la responsabilité de l'interprétation des résultats de patient dans ces circonstances. Les durées de protocole peuvent varier en raison de
différences dans la fixation de tissu et de l'efficacité de l'amélioration de l'antigène, et doivent être déterminées de manière empirique.
Des réactifs de contrôle négatifs doivent être utilisés lors de l'optimisation des conditions de récupération et des durées du protocole.
Dépannage
Consultez la référence 3 pour les mesures correctives.
Contacter le distributeur local ou le bureau régional de Leica Biosystems pour signaler une coloration inhabituelle.

Autres informations

De plus amples informations concernant l'immunomarquage avec les réactifs BOND, sous les rubriques Principes des modalités
opératoires, Matériel nécessaire, Préparation de l'échantillon, Contrôle de qualité, Vérification d'analyse, Interprétation de la
coloration, Légendes des symboles sur les étiquettes et Limites générales, se trouvent dans « Utilisation des réactifs BOND » dans la
documentation utilisateur BOND.
Bibliography
1. Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.
2. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.
3. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.
4. Offit K. MSH6 Mutations in Hereditary Nonpolyposis Colon Cancer: Another Slice of the Pie. Journal of Clinical Oncology. 2004;
22: 4449-4451.
5. Shia J, et al. Value of Immunohistochemical Detection of DNA Mismatch Repair Proteins in Predicting Germline Mutation in
Hereditary Colorectal Neoplasms. The American Journal of Surgical Pathology. 2005; 29: 96-104.
. Ne jamais pipeter les réactifs à la
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