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Le reconditionnement exige les mêmes considérations fondamentales que la décontamination des
échantillons. Les deux procédures reposent sur la résistance relative des bactéries acido-alcoolo-
résistantes à des traitements physiques et chimiques sévères par comparaison aux autres micro-
organismes. Les bactéries acido-alcoolo-résistantes doivent être reconcentrées et réensemencées
dans un nouveau milieu de culture après le traitement par l'agent de décontamination.
1
Ajouter le contenu d'un tube BD BACTEC™ MGIT™ 7 ml contaminé dans un tube en
plastique de 50 ml pour la centrifugation.
2
Ajouter 8 ml de solution NALC-NaOH dans le tube pour la centrifugation. Avec le bouchon
bien serré, agiter le tube au vortex pendant 5 à 20 secondes.
3
Laisser le tube reposer debout pendant 15 à 20 minutes. Ne pas dépasser 20 minutes de
traitement.
4
Ajouter 35 ml de tampon phosphate stérile pH 6,8. Remettre le bouchon et mélanger.
5
Concentrer l'échantillon par 15 minutes de centrifugation à 3 000 x g.
6
Séparer avec précaution le surnageant du calot par décantation. Suspendre à nouveau le
calot à l'aide d'une pipette Pasteur stérile dans du tampon phosphate stérile pH 6,8.
7
Ensemencer 0,5 ml de suspension dans un nouveau tube BD BACTEC™ MGIT™ 7 ml.
Ajouter également une goutte (0,1 ml) de la suspension sur une plaque de gélose 7H10 ou un
autre milieu mycobactérien solide à base de gélose ou d'œuf.
L'ensemencement systématique des milieux solides est notamment important pour une récupération
optimale des mycobactéries sur les échantillons tissulaires car ces types d'échantillons sont
particulièrement sensibles à la récupération sporadique des micro-organismes.
13 – Procédures supplémentaires
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