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Manuel d'utilisation de l'instrument BD BACTEC™ MGIT™
13.1.2 Préparation des tubes de contrôle négatifs MGIT pour
l'interprétation manuelle
Un tube BD BACTEC™ MGIT™ 7 ml non ensemencé non ouvert sert de tube de contrôle négatif.
13.1.3 Lecture manuelle des tubes
Un tube de contrôle positif et un tube de contrôle négatif sont essentiels à une interprétation correcte
des résultats.
1
Retirer les tubes de l'incubateur. Placer les tubes sur la lampe UV à côté d'un tube de contrôle
positif et d'un tube non ensemencé (contrôle négatif). Il est conseillé de placer un seul portoir
de tubes (4 par 10 tubes) sur la lampe UV. Il est préférable que l'éclairage de la pièce soit
normal. Éviter de lire les tubes dans une pièce ensoleillée ou sombre.
2
Repérer visuellement les tubes BD BACTEC™ MGIT™ 7 ml présentant une forte
fluorescence. La fluorescence est décelée sous forme de couleur orange vif au fond du tube,
ainsi que par un reflet orange dans le ménisque. Le tube BD BACTEC™ MGIT™ 7 ml doit
alors être sorti du portoir et comparé au contrôle positif et au contrôle négatif. Le contrôle
positif doit présenter une forte fluorescence (une couleur orange très vive). Le contrôle négatif
ne doit présenter aucune fluorescence ou qu'une très faible fluorescence. Si la fluorescence
dans le tube BD BACTEC™ MGIT™ 7 ml ressemble plus à la fluorescence du tube de
contrôle positif, il s'agit d'un tube positif. Si elle ressemble plus à celle du contrôle négatif, il
s'agit d'un tube négatif. La croissance peut aussi être décelée par la présence d'une turbidité
non homogène, de petits grains ou flocons dans le milieu de culture.
3
Les tubes positifs doivent être soumis à une coloration pour bactéries acido-alcoolo-
résistantes. La contamination bactérienne des tubes négatifs pour la coloration doit être
contrôlée. Le liquide présent dans les tubes BD BACTEC™ MGIT™ 7 ml peut servir aux
repiquages pour les tests d'identification et de sensibilité aux antibiotiques.
4
Les tubes négatifs doivent continuer à être lus pendant huit semaines ou plus suivant le type
d'échantillon et l'expérience passée du laboratoire. Des calendriers de lecture différents
peuvent être établis. La détection des tubes positifs peut être retardée si les tubes ne sont pas
lus pendant plusieurs jours (pendant les week-ends et les vacances par exemple), mais cela
n'affecte pas négativement la performance des milieux. Les tubes doivent être contrôlés
visuellement à la recherche d'une turbidité, de petits grains ou granules avant d'être jetés. Les
tubes BD BACTEC™ MGIT™ 7 ml négatifs ne peuvent pas être réutilisés. Si une croissance
mycobactérienne est suspectée, respecter les instructions données dans la notice
d'emballage des milieux.
13.2
Reconditionnement des tubes BD BACTEC™ MGIT™
7 ml contaminés
En cas de prolifération de micro-organismes non acido-alcoolo-résistants dans un tube BD BACTEC™
MGIT™ 7 ml, une décontamination suivie d'un ensemencement dans un nouveau milieu de culture
peut être effectuée. Le reconditionnement est vivement recommandé si un prélèvement de la source
d'échantillon initiale n'est pas facile à obtenir, dans le cas d'échantillons tissulaires notamment.
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